| 改良盐析法提取全血基因组DNA的影响因素研究 |
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| 引用本文： | 张帅,徐锐,张强,邓勇,刘阳,赖翼.改良盐析法提取全血基因组DNA的影响因素研究[J].中国现代医学杂志,2012,22(35):42-46. |
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| 作者姓名： | 张帅 徐锐 张强 邓勇 刘阳 赖翼 |
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| 作者单位： | 成都医学院检验医学院,四川成都,610083 |
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| 基金项目： | 成都医学院自然基金(项目编号：CYZ08-015,06Z2006-001) |
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| 摘 要： | 目的 观察红细胞裂解时间、DNA纯化方式以及DNA干燥时间对改良盐析法提取全血基因组DNA的影响.方法 改良盐析法提取全血基因组DNA时,分别采用不同的红细胞裂解时间、DNA纯化方式以及DNA干燥时间.使用流式细胞术检测红细胞裂解后的细胞总数及死细胞比例,紫外分光光度计检测DNA的浓度和纯度,琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物.结果 红细胞裂解时间从10 min延长至120 min,死细胞比例随时间延长而增加,但细胞总数、DNA产量与纯度无明显变化；采用异丙醇沉淀法纯化DNA得到的DNA产量与纯度均显著高于使用DNA分离柱纯化的DNA; DNA干燥时间从120 min缩短至30 min,既不影响DNA的产量与纯度,也不影响后续PCR扩增实验.结论 改良盐析法提取全血基因组DNA时,红细胞裂解时间可延长至120 min,DNA干燥时间可缩短至30 min,异丙醇沉淀法优于DNA分离柱纯化的DNA.
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| 关 键 词： | 全血基因组DNA提取 改良盐析法 红细胞裂解时间 DNA纯化方式 DNA干燥时间 |
Influencing factors on Genomic DNA extraction from whole blood using modified salting-out method |
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