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大豆24 kDa油体蛋白基因与aFGF融合转化红花的研究
引用本文:盖玉红,王旺,金潇,王嘉琪,李宏博,王刚,杨晶,魏健. 大豆24 kDa油体蛋白基因与aFGF融合转化红花的研究[J]. 中国中药杂志, 2013, 38(12): 1898-1904
作者姓名:盖玉红  王旺  金潇  王嘉琪  李宏博  王刚  杨晶  魏健
作者单位:吉林农业大学 农学院, 吉林 长春 130118;长春师范大学 生命科学学院, 吉林 长春 130032;长春师范大学 生命科学学院, 吉林 长春 130032;长春师范大学 生命科学学院, 吉林 长春 130032;长春师范大学 生命科学学院, 吉林 长春 130032;长春师范大学 生命科学学院, 吉林 长春 130032;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春130118;长春师范大学 生命科学学院, 吉林 长春 130032;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心, 吉林 长春130118
基金项目:国家高技术研究发展计划(863)项目(SQ2010AA1000691008);教育部科技创新工程重大项目培育基金项目(70S018);吉林农业大学2012年校内基金项目
摘    要:目的: 利用红花表达酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF),为利用植物生物反应器规模化生产aFGF奠定基础. 方法: 将人源aFGF基因改造为植物偏好性的aFGF基因序列,通过PCR搭桥技术克隆植物偏好的aFGF基因,利用酶切连接方法构建植物油体表达载体,通过冻融法转到根瘤农杆菌EHA105,利用农杆菌介导的方法转化到塔城红花中,对转化红花进行PCR,Southern杂交,RT-PCR分子检测. 结果: 扩增出植物偏好的aFGF基因的全长序列,并与大豆油体蛋白基因Doil基因融合,成功地插入到改造好的含有大豆油体蛋白启动子表达载体中, 探索了进行红花遗传转化的最佳条件,成功获得单位点插入的3个独立转化红花植株,在转录水平都有大小一致的aFGF的表达. 结论: 该实验成功构建了含aFGF植物油体表达载体,并筛选出最佳的遗传转化条件,A为0.6,侵染时间为10 min,共培养3 d,获得了aFGF转录水平表达的转基因红花植株,这将红花油体蛋白本身的皮肤保护作用,与FGFs的创伤修复作用累加,快速开发出外用创伤药物奠定基础.

关 键 词:aFGF  油体蛋白  红花
收稿时间:2012-10-10

Study on human aFGF fusion gene transformation with soybean 24 kDa oleosin and expression in safflower
GAI Yu-hong,WANG Wang,JIN Xiao,WANG Jia-qi,LI Hong-bo,WANG Gang,YANG Jing and WEI Jian. Study on human aFGF fusion gene transformation with soybean 24 kDa oleosin and expression in safflower[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2013, 38(12): 1898-1904
Authors:GAI Yu-hong  WANG Wang  JIN Xiao  WANG Jia-qi  LI Hong-bo  WANG Gang  YANG Jing  WEI Jian
Affiliation:Agricultural Sciences College, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Science, Changchun Normal Univercity, Changchun 130118, China;College of Life Science, Changchun Normal Univercity, Changchun 130118, China;College of Life Science, Changchun Normal Univercity, Changchun 130118, China;College of Life Science, Changchun Normal Univercity, Changchun 130118, China;College of Life Science, Changchun Normal Univercity, Changchun 130118, China;Ministry of Education Bioreactor and Drug Development Research Center, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;College of Life Science, Changchun Normal Univercity, Changchun 130118, China;Ministry of Education Bioreactor and Drug Development Research Center, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China
Abstract:
Keywords:aFGF  oleosin  safflower
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