HPLC法测定血浆及组织中替硝唑、环丙沙星和消炎痛的含量

目的：建立用HPLC测定血浆和组织中替硝唑、环丙沙星和消炎痛的方法，为研究外用复方制剂的药代动力学提供依据。方法：取血浆或组织匀浆200μl，加甲醇400μl沉淀蛋白，离心后取上清液450μl，于60℃通空气吹干，残渣用50μl甲醇溶解，离心后进样20μl。色谱条件：C18-ODS柱，替硝唑与消炎痛同时测定，流动相为甲醇-水(55：50)，流速0．8ml／min，检测波长310nm(0-5．4min)、277nm(5．4-10min)，环丙沙星单独测定，流动相为甲醇-水(40：60)，含0．12％NH4H2PO4，H3PO4调pH3．6 0．2)，流速0．8ml／min，检测波长277nm。结果：替硝唑浓度在0．02-4．0μg／ml范围内与峰面积线性关系良好，r=0．9998，其日内日间差异性≤6．3l，平均回收率为92．05％-93．80％；环丙沙星浓度在0．02-4．0μg／ml范围内与峰面积线性关系良好，r=0．9984，其日内日间差异性≤4．76，平均回收率在99．77-104．23间；消炎痛浓度在0．06～8．0μg／ml范围内与峰面积线性关系良好，r=0．9998，其日内日间差异性≤5．45，平均回收率为98．96％-110．00％。结论：该方法灵敏、可靠，适于测定血浆和组织中替硝唑、环丙沙星和消炎痛的含量。