LIM矿化蛋白1在人牙髓及根尖牙乳头中的表达

目的 比较人年轻恒牙牙髓、根尖牙乳头及成熟恒牙牙髓组织中LIM矿化蛋白1(LIMmineralization protein-1,LMP-1)的表达,探寻LMP-1在牙髓牙本质复合体发育和成熟中的作用.方法 收集48颗因正畸拔除的健康前磨牙,其中年轻和成熟恒牙各24颗,样本来源对象的年龄分别为11 ～14岁和18 ～30岁.拔除后即刻分离获得年轻恒牙的牙髓和根尖牙乳头组织(各24个样本)以及成熟恒牙的牙髓组织(24个样本).实验分组如下:第1组为牙根形成2/3的年轻恒牙的根尖牙乳头组织;第2组为牙根形成2/3的年轻恒牙的牙髓组织;第3组为成熟恒牙的牙髓组织.每组12个样本用于反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)检测,另12个样本用于蛋白质印迹法检测,以β-肌动蛋白做内参.图像分析软件(Meta Morph 6.2.6)对阳性条带进行灰度值测定,目的条带与内参的灰度值比值为LMP-1的表达强度.应用SPSS13.0对数据进行统计学分析,LMP-1在年轻恒牙根尖牙乳头与牙髓组织之间的表达强度的两两比较采用两配对样本的t检验,年轻恒牙牙髓与成熟恒牙牙髓组织之间的表达强度的两两比较采用两独立样本的t检验,以双侧P＜0.05为差异有统计学意义.结果 LMP-1 mRNA在年轻恒牙的根尖牙乳头、牙髓和成熟恒牙的牙髓组织中的表达强度分别为0.25±0.09、0.46±0.24和0.31 ±0.10,经两样本t检验分析,LMP-1的基因表达在第2组年轻恒牙牙髓组织明显高于其在第1组年轻恒牙根尖牙乳头组织(t=2.92)以及第3组成熟恒牙牙髓组织的表达强度(t=2.31,P＜0.05).LMP-1蛋白在3组中的表达强度分别为0.33 ±0.08、0.82±0.10和0.52 ±0.19,LMP-1的蛋白表达在第2组显著高于第1组(t=3.33)及第3组中的表达强度(t =3.11,P＜0.05).结论 无论是在mRNA水平还是在蛋白水平,LMP-1在人年轻恒牙牙髓、根尖牙乳头以及成熟恒牙牙髓组织中均有不同程度的表达,提示LMP-1在牙髓牙本质复合体发育和成熟过程中可能发挥重要作用.

Expression of LIM mineralization protein-1 in the apical papilla and dental pulp tissues of human teeth