Peroxiredoxin Ⅱ在小鼠卵巢中卵泡、GV卵、MⅡ卵和植入前胚的表达和定位

目的:观察PeroxiredoxinⅡ在小鼠卵巢中卵泡和植入前胚的表达与定位,为探讨PeroxiredoxinⅡ在小鼠卵母细胞发育成熟和早 期胚发育的作用提供依据.方法:根据小鼠PeroxiredoxinⅡmRNA序列(AccessionNo:BC002034)设计引物,对小鼠生发泡完整 卵细胞(GV卵)中的PeroxiredoxinⅡ可能编码区进行扩增.同时,取生后3d和2mo小鼠的卵巢,免疫细胞化学染色显示Perox iredoxinⅡ蛋白在卵泡中的分布.此外,运用RT PCR和免疫细胞化学染色方法观察PeroxiredoxinⅡ在植入前胚的表达.结果:从 GV卵中扩增所得684bp的cDNA序列,与小鼠PeroxiredoxinⅡ具有99%同源性;其推导的编码氨基酸序列与小鼠Peroxiredoxin Ⅱ氨基酸序列完全相同.免疫细胞化学染色显示:生后3d小鼠卵巢内未见PeroxiredoxinⅡ阳性反应;2mo小鼠卵巢内阳性反应 见于初级卵泡、次级卵泡和近成熟卵泡中卵母细胞的胞质.卵泡细胞未见PeroxiredoxinⅡ阳性反应.RT PCR结果表明:Peroxire doxinⅡmRNA在GV卵中处高水平,从MⅡ卵开始略有下降,在4 细胞胚和早期囊胚期间未检到.免疫细胞化学染色显示:GV 卵、MⅡ卵、1 细胞胚、2 细胞胚、4 细胞胚、8 细胞胚、桑椹胚和早期囊胚均呈PeroxiedoxinⅡ阳性反应.结论:PeroxiredoxinⅡmR NA和蛋白在小鼠植入前胚的表达存在时程差别,