| CEA siRNA载体的构建和转染人食管癌EC9706细胞的沉默作用 |
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| 引用本文： | 郑红,赵国强,杨洪艳,刘康栋,冯龙,董子明. CEA siRNA载体的构建和转染人食管癌EC9706细胞的沉默作用[J]. 医学争鸣, 2007, 28(23): 2116-2118 |
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| 作者姓名： | 郑红 赵国强 杨洪艳 刘康栋 冯龙 董子明 |
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| 作者单位： | 郑州大学基础医学院病理生理学教研室,河南,郑州,450052;郑州大学基础医学院微生物免疫学教研室,河南,郑州,450052 |
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| 基金项目： | 教育部科技创新工程重点项目 |
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| 摘 要： | 目的:应用RNA干扰技术,构建针对CEA的siRNA载体,抑制人食管癌EC9706细胞CEA基因的表达.方法:依据设计siRNA的原则,针对人CEA的mRNA序列,设计并合成编码siRNA的两对寡核苷酸序列,经退火成互补双链,克隆入载体pRNAT-U6.2中构建重组体pRNAT-U6.2-CEA,筛选、鉴定.然后转染重组体至人食管癌EC9706细胞中,经G418筛选,获得阳性克隆,并以空质粒转染和未进行转染的EC9706作对照,运用PCR和Western Blot检测CEA的表达.结果:测序鉴定证实目的寡核苷酸片断已被克隆到pRNAT-U6.2载体中,pRNAT-U6.2-CEA转染人食管癌EC9706细胞后,CEA基因表达在mRNA和蛋白质水平都受到显著抑制.结论:成功构建了针对人食管癌EC9706细胞的siRNA载体,可有效抑制CEA的表达,为进一步从分子水平探讨CEA的功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | EC9706细胞系 小干扰RNA 癌胚抗原 |
| 文章编号： | 1000-2790(2007)23-2116-03 |
| 修稿时间： | 2007-05-23 |
Construction of CEA siRNA expression vector and its inhibitory effects on the expression of CEA in EC9706 cells |
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| ZHENG Hong,ZHAO Guo-Qiang,YANG Hong-Yan,LIU Kang-Dong,FENG Long,DONG Zi-Ming. Construction of CEA siRNA expression vector and its inhibitory effects on the expression of CEA in EC9706 cells[J]. Negative, 2007, 28(23): 2116-2118 |
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| Authors: | ZHENG Hong ZHAO Guo-Qiang YANG Hong-Yan LIU Kang-Dong FENG Long DONG Zi-Ming |
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