| 重组人N端缺失MBL的原核表达及其活性研究 |
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| 引用本文： | 雷鸣,左大明,王明永,张雅妮,陈政良.重组人N端缺失MBL的原核表达及其活性研究[J].免疫学杂志,2008,24(3):346-349. |
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| 作者姓名： | 雷鸣 左大明 王明永 张雅妮 陈政良 |
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| 作者单位： | 南方医科大学免疫学教研室,广州,510515 |
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| 摘 要： | 目的 原核表达具生物学活性的重组人N端缺失甘露聚糖结合凝集素(rhMBLΔN)蛋白.方法 应用PCR技术,从含中国人野生型MBL cDNA的质粒pGEM-MBL中扩增rhMBLΔN基因片段,插入pET43.1a载体后,转化E.coli BL21(DE3)感受态菌诱导表达rhMBLΔN蛋白.应用Ni2 -NTA琼脂糖柱纯化目的 蛋白,以SDS-PAGE、Western blot和ELISA进行鉴定.结果 从pGEM-MBL中扩增到长约620bp的DNA片段,构建的重组表达载体经Bam HI和Eco RI酶切后出现约7270bp和620bp的片段,测序结果与预期的完全一致.表达的重组蛋白纯化后,经SDS-PAGE鉴定为Mr97000的蛋白.ELISA证实,纯化蛋白能与抗重组人MBL抗体结合,具备配体结合活性并能与人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1、2的N端片段结合.结论 获得了可表达rhMBLΔN的菌株和具活性的rhMBΔN蛋白,为进一步研究提供了条件.
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| 关 键 词： | 甘露聚糖结合凝集素 N端缺失 原核表达 活性 |
| 文章编号： | 1000-8861(2008)03-0346-04 |
| 修稿时间： | 2007年10月9日 |
Prokaryotic expression and biological activities of recombinant human MBL N-terminal deletant (rhMBLΔN) |
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| LEI Ming,ZUO Da-ming,WANG Ming-yong,ZHANG Ya-ni,CHEN Zheng-liang.Prokaryotic expression and biological activities of recombinant human MBL N-terminal deletant (rhMBLΔN)[J].Immunological Journal,2008,24(3):346-349. |
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| Authors: | LEI Ming ZUO Da-ming WANG Ming-yong ZHANG Ya-ni CHEN Zheng-liang |
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