大鼠少突胶质前体细胞纯化及原代培养的新方法 |
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作者姓名: | 李世平 朱将虎 屈艺 郑臻 母得志 |
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作者单位: | 四川大学华西第二医院儿科·出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室,四川大学华西第二医院儿科·出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室,四川大学华西第二医院儿科·出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室,四川大学华西第二医院儿科·出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室,四川大学华西第二医院儿科·出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81330016,81630038,81270724);四川省科技厅基金(2014SZ0149,2016TD0002) |
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摘 要: | 【摘要】目的 建立简单、高效的少突胶质前体细胞(OPCs)分离培养方法。方法 取出生2天的SD大鼠大脑皮层,分离消化皮层细胞为单细胞悬液,采用A2B5免疫磁珠提纯OPCs进行体外培养,倒置显微镜观察细胞生长状况,并在第7天采用免疫荧光检测OPCs特异性标志A2B5和O4;培养7天后换为OPCs分化培养基诱导OPCs分化,分化培养7天后,免疫荧光法检测成熟少突胶质细胞特异性标志骨髓碱性蛋白(MBP)。结果 培养过程中观察发现,95%以上的细胞具有双极或三级突起的典型形态,免疫荧光显示纯化培养的OPCs 95%以上表达A2B5和O4;分化培养后95%以上的细胞为MBP阳性的少突胶质细胞。结论 采用磁珠法可以获得高纯度的OPCs,并且细胞具有分化为成熟少突胶质细胞的能力。
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关 键 词: | OPCs;A2B5免疫磁珠;OPCs分化;原代培养 |
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