褪黑素对大鼠急性脊髓损伤后Nrf2-ARE信号通路的影响

目的 观察褪黑素(MT)对大鼠急性脊髓损伤后血红素氧化酶-1（HO-1）、磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶-1（NQO-1）、红细胞衍生的核因子2相关因子2(Nrf2)表达的影响,探讨褪黑素在Nrf2-ARE信号通路中的作用机制。 方法 采用随机数字表法将72只成年SD大鼠分为对照组、损伤组及褪黑素组,每组24只。采用改良Allen′s法将损伤组及褪黑素组大鼠制成T11-T12脊髓损伤模型,并分别在脊髓损伤10min后腹腔注射等量无水乙醇或MT制剂;对照组仅行椎板切除暴露T11-T12节段,不损伤脊髓神经。各组分别于制模后6h、12h、24h时随机选取6只大鼠处死,提取T11-T12节段脊髓标本。采用HE染色法观察脊髓损伤及炎性反应情况;采用免疫荧光法检测HO-1、NQO-1及Nrf2蛋白表达;采用RT-PCR法检测大鼠脊髓组织中HO-1、NQO-1、Nrf2 mRNA表达。 结果 对照组脊髓神经元细胞形态正常,无水肿及坏死,无明显出血点;损伤组脊髓可见出血灶,炎性细胞明显增多,部分神经元水肿、坏死;褪黑素组脊髓出血灶较损伤组明显减小,神经元水肿程度亦相对较轻。在制模后12h、24h时发现褪黑素组脊髓HO-1、NQO-1及Nrf2 mRNA表达水平均显著强于损伤组及对照组（均P<0.05）,损伤组脊髓HO-1、NQO-1及Nrf2 mRNA表达水平亦显著强于对照组（均P<0.05）。免疫荧光结果显示：褪黑素组脊髓切片中HO-1、NQO-1、Nrf2阳性细胞数量最多,损伤组次之,对照组最少,各组间差异均具有统计学意义（均P<0.05）。 结论 褪黑素可促进急性脊髓损伤大鼠脊髓中HO-1、NQO-1及Nrf2表达,其作用机制可能与激活Nrf2-ARE信号通路有关。

Effects of melatonin on the Nrf2-ARE signaling pathway after spinal cord injury