体外人巨细胞病毒感染细胞细胞周期素表达改变与细胞病变的关系 |
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引用本文: | 陈敦金,赵杨,闻良珍,佘若菁.体外人巨细胞病毒感染细胞细胞周期素表达改变与细胞病变的关系[J].热带医学杂志,2004,4(4):377-381. |
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作者姓名: | 陈敦金 赵杨 闻良珍 佘若菁 |
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作者单位: | 1. 广州市第二人民医院妇产科,广州市重症孕产妇救治中心,广州,510150 2. 广东省人民医院妇产科,广州,510080 3. 华中科技大学同济医学院附属同济医院,妇产科,武汉,430030 |
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基金项目: | 国家自然科学资金资助项目(No.30271673),广东省科委资助项目(No.2002B30506)。 |
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摘 要: | 目的探讨人巨细胞病毒( human cytomegalovirus, HCMV)感染的人胚肺成纤维上皮细胞( human embryo lung fibroblast, HEL)细胞周期素 E (cyclin E)、 D (cyclin D)、 A (cyclin A)、 B (cyclin B)表达的改变与细胞病变的关系.方法建立体外 HCMV感染细胞膜型,观察感染细胞感染 12、 48h后细胞病变( cytopathologic effects, CPE);并在相同时间点收获细胞,用乙醇固定 HCMV感染的宿主细胞后用 PI染色,经流式细胞术( FACSVantage)根据细胞 DNA倍性分选出 G1、 S、 G2/M期细胞,然后分别取等量细胞裂解, 用 Western blot分析上面各不同时相细胞中 cyclins的表达.结果 ①培养 12h,仅病毒感染组在电镜可观察到细胞肿胀,其余各组未见明显病变;②培养 48h,与 HCMV169感染组相比,药物干预 HCMV169感染 HEL两组细胞中,光镜及电镜 CPE程度较轻,正常组细胞无 CPE;③乙醇固定细胞经流式细胞术分选,感染 12、 48h细胞均以 G1为主,少见 S期细胞、未见 G2期和 M期的细胞,与正常对照组比较有显著差异( P< 0.05);根据细胞 DNA倍性分选出的各期细胞裂解行 Western blot检测,正常细胞未检测到 cyclins,感染细胞中 cyclin E、 cyclin D有明显表达,未见 cyclin A、 cyclin B的表达.④ Western blot对分选后的感染细胞中 cyclin E、 cyclin D表达的检测与流式细胞术分析的结果一致.结论体外 HCMV感染细胞细胞周期进程受阻与细胞病变关系密切,细胞周期进程异常可能是导致细胞病变的病理学基础.
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关 键 词: | 人巨细胞病毒 细胞周期蛋白 人胚肺成纤维细胞 流式细胞仪 蛋白免疫印记法 |
文章编号: | 1672-3619(2004)04-0377-05 |
修稿时间: | 2004年3月19日 |
The Relationship between the Cyto-pathological Change and Cyclins Expression in Human Cytomegalovirus Infected Human Embryo Lung Fibroblast |
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Abstract: | |
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Keywords: | flow cytometry cyclins human embryo lung fibroblast human cytomeg alovirus Western blot |
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