| 重叠区扩增基因拼接法在构建膜锚定共刺激分子融合基因上的应用 |
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| 引用本文： | 易平勇,余海,马文学,孙文军,姜槐.重叠区扩增基因拼接法在构建膜锚定共刺激分子融合基因上的应用[J].实用肿瘤杂志,2002,17(6):401-403. |
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| 作者姓名： | 易平勇 余海 马文学 孙文军 姜槐 |
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| 作者单位： | 浙江大学医学院,浙江,杭州,310006 |
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| 摘 要： | 目的 将小鼠共刺激分子 B7- 1(m B7- 1)基因的胞外区与人胎盘碱性磷酸酶 (h PL AP- 1) C末端信号肽序列进行拼接 ,探讨其形成融合基因的作用。方法 利用重叠区扩增基因拼接法 ,分别扩增 h PL AP- 1C末端信号肽序列和 m B7- 1基因的胞外区序列 ,然后将二段基因拼接起来 ,拼接后与 p GEM- T克隆载体连接 ,酶切和测序鉴定。结果 分别成功扩增出 h PL AP- 1C末端信号肽序列 15 5 bp和 m B7- 1基因的胞外区序列 76 4 bp,并将二段基因序列成功拼接 (891bp) ,经测序是正确的。结论 重叠区扩增基因拼接法能拼接 m B7- 1基因的胞外区与 h PL AP-1C末端信号肽序列 ,能形成融合基因
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| 关 键 词： | 融合蛋白质类 刺激抗原 碱性磷酸酶 胎盘 糖基磷脂酰肌醇类 重叠区扩增基因拼接法 |
| 文章编号： | 1001-1692(2002)06-0401-03 |
| 修稿时间： | 2001年10月19 |
Construction of a fusion mB7.1-Hplap-1 Cdna by gene SOEing |
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