miR-10b-5p通过靶向SUFU介导乳腺癌细胞对放疗的敏感性★

目的 探讨miR-10b-5p在乳腺癌细胞放疗敏感性中的作用及相关机制。方法 采用qPCR和Western blotting检测正常乳腺细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF-7、SKBR-3、MDA-MB-231中miR-10b-5p mRNA、SUFU mRNA和蛋白的表达。在MDA-MB-231细胞中转染miR-10b-5p inhibitor对miR-10b-5p进行敲减，6 Gy ⁶⁰Co γ-射线照射2 h，分别采用克隆形成实验和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡水平；双荧光素酶报告实验验证靶基因SUFU，回补实验验证miR-10b-5p是否通过靶向SUFU介导乳腺癌细胞对放疗的敏感性。结果 3种乳腺癌细胞系中miR-10b-5p的表达均显著高于正常乳腺细胞MCF-10A（P<0.05）。与miR-NC组相比，miR-10b-5p inhibitor组细胞增殖水平明显下降（P<0.05），凋亡水平显著上升（P<0.05）。敲减miR-10b-5p可增加野生型SUFU 3''UTR的荧光强度（P<0.05），而对突变型SUFU 3''UTR的荧光强度无明显影响（P>0.05）。此外，miR-10b-5p inhibitor组SUFU蛋白表达水平显著高于miR-NC组（P<0.05）。与miR-NC+si-NC组相比，miR-10b-5p inhibitor+si-NC组细胞增殖水平显著降低（P<0.05），miR-10b-5p inhibitor+si-SUFU#2组细胞增殖水平明显回升，且高于miR-10b-5p inhibitor+si-NC组（P<0.05）。结论 乳腺癌细胞中miR-10b-5p呈高表达，敲减miR-10b-5p可增强乳腺癌细胞对放疗的敏感性，其机制可能与靶向抑制SUFU相关。