基于TLR4/NLRP3通路探讨葛黄颗粒含药血清对乙醇诱导的L-02肝细胞损伤的保护作用及机制研究＊

目的 探讨葛黄颗粒含药血清对乙醇诱导的L-02肝细胞损伤的影响及其可能机制。方法 SD雄性大鼠45只,随机分为三组（15只/组）：空白对照组、葛黄颗粒组及美他多辛组。空白对照组予以蒸馏水灌胃、葛黄颗粒组（3.1 g·100 g^-1·d^-1）、美他多辛组（0.1 g·100 g^-1·d^-1）灌胃,连续干预5天,腹主动脉取血制备含药血清。将L-02肝细胞分为六组并按以下方式干预：正常组（加入10%正常大鼠血清）、模型组（在正常组基础上加入3%乙醇）、葛黄颗粒高、中、低剂量组（分别加入不同浓度葛黄颗粒含药血清及正常大鼠血清及3%乙醇）、美他多辛组（加入3%乙醇、美他多辛及正常大鼠血清各5%）,将L-02肝细胞培养24 h后进行之后实验部分。ELISA法检测NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-18水平;RT-PCR法检测NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA的表达;Western blot法检测TLR4、NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达。结果 与正常组比较：模型组NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-18明显升高,NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达明显升高,TLR4、NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达均亦明显升高（P<0.05）;与模型组相比较：以上指标在葛黄颗粒高、中剂量组及美他多辛组表达水平均有所降低（P<0.05）;与美他多辛组比较：葛黄颗粒高剂量组中TNF-α、IL-18有统计学意义（P<0.05）,而IL-1β、NF-KB差异则不显著（P>0.05）;葛黄颗粒低剂量组中NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA差异显著（P<0.05）,而在高、中剂量组差异则均无统计学意义（P>0.05）;TLR4、NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达水平在葛黄颗粒各剂量组均有统计学意义（P<0.05）。结论 葛黄颗粒含药血清可能通过TLR4/NLRP3信号通路改善乙醇诱导的肝细胞炎症损伤。

To Explore the Protective Effect and Mechanism of Gehuang Granule Containing Serum on Ethanol Induced L-02 Hepatocyte Injury Based on TLR4/NLRP3 Pathway