蒿芩清胆汤对流行性感冒病毒性肺炎湿热证小鼠机体的免疫调节作用

目的 在动物模型的基础上,探讨蒿芩清胆汤在小鼠机体免疫调节中的信号传导机制,为该药物治疗湿热证打下理论基础.方法 采用随机数字表法将40只由美国国立卫生研究院(National Institute of Health,NIH)培育而成的小鼠(1980年引进我国,简称NTH小鼠)分为正常组8只、流行性感冒(简称流感)病毒组(单纯病毒感染)8只、复合模型组(高脂饮食+湿热环境+病毒感染)8只、阳性药物组(模型组+病毒唑)8只、蒿芩清胆汤组(模型组+蒿芩清胆汤)8只.计算各组小鼠肺指数及肺指数抑制率;提取小鼠腹腔巨噬细胞用逆转录PCR(RT-PCR)法检测TLR2(Toll样受体-2)及NF-κB mRNA(核因子κB-mRNA)的表达;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定标本中白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)的浓度,求出IFN-γ/IL-4比值用于了解机体Th1/Ih2(Th1类与Th2类细胞比值)类细胞的平衡状态.结果 正常组、病毒组、复合模型组、阳性药物组和蒿芩清胆汤组小鼠的肺指数分别为(0.79±0.11)%、(1.93±0.38)%、(1.41±0.26)%、(1.10±0.26)%、(1.02±0.16)%;阳性药物组和蒿芩清胆汤组小鼠的肺指数和复合模型组相比均有所减低,有统计学意义(t=0.322,P＜0.05).RT-PCR的结果显示,正常组、病毒组、复合模型组、阳性药物组和蒿芩清胆汤组TLR2 mRNA的表达分别是0.145±0.017、0.991±0.149、0.903±0.124、0.257±0.032和0.413±0.031;蒿芩清胆汤组、阳性药物组比复合模型组的小鼠低,均有统计学意义(t=0.013,F=73.467,P＜0.05).正常组、病毒组、复合模型组、阳性药物组和蒿芩清胆汤组NF-κB mRNA的表达分别是0.075±0.015、379±0.019、0.291±0.012、0.169±0.026和0.175±0.033;阳性药物组、蒿芩清胆汤组与复合模型组相比均有所减低(t=0.422,F=112.834,P＜0.05).正常组、病毒组、复合模型组、阳性药物组和蒿芩清胆汤组小鼠血清中IFN-γ含量分别为(7434.06±323.27)pg/ml、(8679.77±198.70)pg/ml、(8068.78±113.8)pg/ml、(7454.66±301.30)pg/ml和(7484.56±229.85)pg/ml;蒿芩清胆汤组和阳性药物组血清中IFN-γ含量比复合模型组减低,有统计学意义(t=0.201,F=5.390,P＜0.05).正常组、病毒组、复合模型组、阳性药物组和蒿芩清胆汤组小鼠血清中IL-4含量分别为(3701.74±256.00)pg/ml、(3569.64±161.35)pg/ml、(3530.88±334.63)pg/ml、(3481.84±282.25)pg/ml和(3618.00±262.16)pg/ml;各组间差异无统计学意义(t=0.414,F=0.505,P＞0.05).Th1/Th2比值(即:IFN-γIL-4)分别为:2.02±0.19、2.38±0.10、2.36±0.14、2.22±0.17和2.07±0.15;与复合模型组相比,蒿芩清胆汤组和阳性药物组均呈减低趋势,但无统计学意义(t=0.587,F=3.684,P＞0.05).结论 蒿芩清胆汤对流感病毒性肺炎湿热证疗效显著,它通过降低膜表面受体TLR2的表达来抑制NF-κB的活化,降低血清IFN-γ水平,使Th1/Th2类细胞趋于平衡;降低肺泡内炎症反应,从而达到减少肺组织损伤的治疗目的 .

The mechanism of signal extension in Haoqin Qingdan decoction immunity activity in Damp-heat syndrome of pneumonia disease infected by influenza virus