| 自身抗原OGDC-E2融合蛋白的克隆表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 周晔,姚定康,陈燕,蒋天舒,蒋延旺,吴传勇,钱.自身抗原OGDC-E2融合蛋白的克隆表达与鉴定[J].中国实验诊断学,2006,10(7):722-724. |
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| 作者姓名： | 周晔 姚定康 陈燕 蒋天舒 蒋延旺 吴传勇 钱 |
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| 作者单位： | 第二军医大学长征医院,实验诊断科,全军临床免疫中心,上海,200003 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;上海市科技攻关项目;上海市科研项目;上海市青年科技启明星计划 |
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| 摘 要： | 目的 基因工程重组表达2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2（OGDC-E2）融合蛋白。方法 用PCR方法扩增得到OGDC-E2的基因片段，插入表达载体pET28a（＋），构建重组表达载体pET28a（＋）-OGDC-E2，测序正确后在大肠杆菌BL21（DE3）中表达。结果 获得OGDC-E2融合蛋白，经SDS-PAGE分析，相对分子质量与预期大小一致；经免疫学鉴定，重组抗原片段具有抗线粒体抗体二亚型（AMA-M2）的免疫原性。结论 基因重组表达的融合蛋白将有利于原发性胆汁性肝硬化（PBC）的实验诊断。
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| 关 键 词： | 自身抗原 重组融合蛋白 |
| 文章编号： | 1007-4287（2006）07-0722-03 |
| 收稿时间： | 2006-03-13 |
| 修稿时间： | 2006年3月13日 |
The cDNA cloning and expression of autoantigen OGDC-E2 |
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| ZHOU Ye , YAO Ding-kang , CHEN Yan,et al..The cDNA cloning and expression of autoantigen OGDC-E2[J].Chinese Journal of Laboratory Diagnosis,2006,10(7):722-724. |
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| Authors: | ZHOU Ye YAO Ding-kang CHEN Yan |
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| Institution: | ZHOU Ye , YAO Ding-kang , CHEN Yan, et al. |
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| Abstract: | Objective To express OGDC-E2 recombinant fusion protein in E.coli.Methods The cDNA encoding OGDC-E2 was obtained by RT-PCR,confirmed by DNA sequencing,subcloned unidirectionally into the bacterial expression plasmid pET28a(+) and then transformed into E.coil.BL21(DE3) to express the recombinant fusion protein induced by IPTG.Results The recombinant fusion protein exhibited the antigenicity of AMA-M2 by Western blotting.Conclusion The OGDC-E2 recombinant fusion protein could be used for diagnosing PBC. |
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| Keywords: | PBC OGDC-E2 |
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