| 重组TACE前肽对自身TACE活性的抑制作用 |
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| 引用本文： | 李小鸥,阎媛,黄巍,杨渝珍,王宏伟.重组TACE前肽对自身TACE活性的抑制作用[J].中华微生物学和免疫学杂志,2008,28(1). |
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| 作者姓名： | 李小鸥 阎媛 黄巍 杨渝珍 王宏伟 |
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| 作者单位： | 1. 华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科心血管,武汉,430030
2. 华中科技大学同济医学院生化与分子生物学系,武汉,430030 |
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| 摘 要： | 目的 以脂多糖(LPS)刺激人单核细胞型淋巴瘤细胞株THP-1为模型,观察重组肿瘤坏死因子α转换酶(TACE)前肽结构域对催化TACE结构域的自身抑制作用,为人工干预炎症过程提供依据和手段.方法 首先利用DNA重组技术分别构造含前肽结构域和催化结构域的重组载体:用PCR方法 扩增出TACE的胞外结构域(T1300)和前肽结构域(T591),并克隆至载体pET-28a(+)中,转化至大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达出带有His-tag的目的 蛋白,两者均为包涵体,变性复活后经Ni2+-NTA亲和层析柱对表达的重组蛋白进行纯化.对纯化后的蛋白进行Western blot分析.LPS分时相刺激THP-1细胞后,用细胞学技术观察纯化的T591在蛋白质水平上对TACE的表达和活性的影响.结果 TACE重组前肽蛋白能显著抑制TACE的活性,减少分泌型TNF-α(sTNF-α)分泌,抑制率达57%.结论 TACE重组前肽抑制了TACE的活性,降低了sTNF-α的分泌,为抗炎药物的设计和改造提供了新的依据和方法 .
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| 关 键 词： | 肿瘤坏死因子α 肿瘤坏死因子α转换酶 前肽结构域 抑制剂 |
Inhibition of the recombinant TACE pro-domain to TACE |
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| LI Xiao-ou,YAN Yuan,HUANG Wei,YANG Yu-zhen,WANG Hong-wei.Inhibition of the recombinant TACE pro-domain to TACE[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2008,28(1). |
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| Authors: | LI Xiao-ou YAN Yuan HUANG Wei YANG Yu-zhen WANG Hong-wei |
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