| 载脂蛋白AⅠ基因启动子和内含子1中的单核苷酸多态性对其表达的影响 |
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| 引用本文： | 程爱娟,毛用敏,崔让庄.载脂蛋白AⅠ基因启动子和内含子1中的单核苷酸多态性对其表达的影响[J].中华医学遗传学杂志,2006,23(6):610-613. |
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| 作者姓名： | 程爱娟 毛用敏 崔让庄 |
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| 作者单位： | 300051,天津胸科医院心血管外科 |
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| 摘 要： | 目的构建含ApoAⅠ基因调控区和荧光素酶报告基因的真核表达载体，探讨ApoAⅠ基因启动子区域-75bp G→A置换及第1内含子＋83bp C→T置换对ApoAⅠ表达的影响。方法采用PCR方法扩增人染色体中含ApoAⅠ基因-145～＋289bp的DNA片段，筛选出含ApoAⅠAA／CC基因型（-75bp变异，＋83bp无变异）、GG／TT基因型（-75bp无变异，＋83bp变异）及GG／CC（-75bp和＋83bp均无变异）的DNA片段，构建含以上3个基因片段的pUC重组载体，经SacⅠ和BglⅡ酶切后，再将不同的DNA片段连接到含荧光素酶报告基因的pGL2载体中，获得多个重组克隆。采用阳离子脂质体转染法将携带萤火虫荧光素酶报告基因的重组质粒和携带海肾荧光素酶报告基因的对照质粒共转染HepG2细胞，经48h培养，用化学发光法测定细胞裂解液中荧光素酶的活性，以反映ApoAⅠ的表达水平。结果质粒重组获得3个pGL2-ApoAⅠ-L（-2500～＋289bp）长片段质粒和3个pGL2-ApoAⅠ-S（-145～＋289bp）短片段质粒，分别含AA／CC、GG／TT及GG／CC3种基因型。荧光素酶报告基因活性显示：ApoAⅠAA／CC或GG／TT基因型携带者引起荧光素酶相对活性明显低于GG／CC基因型者。结论基因启动子ApoAⅠ-75bp G→A置换和＋83bp C→T置换对ApoAⅠ转录活性起抑制作用，这可能是-75A和＋83T等位基因携带者高密度脂蛋白血浆水平降低的原因。
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| 关 键 词： | 载脂蛋白AⅠ基因 载脂蛋白AⅠ 基因表达调控 |
| 收稿时间： | 2006-02-28 |
| 修稿时间： | 2006年2月28日 |
The effect of gene polymorphism in promoter and intron 1 on human ApoAⅠ expression |
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| CHENG Ai-juan,MAO Yong-min,CUI Rang-zhuang.The effect of gene polymorphism in promoter and intron 1 on human ApoAⅠ expression[J].Chinese Journal of Medical Genetics,2006,23(6):610-613. |
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| Authors: | CHENG Ai-juan MAO Yong-min CUI Rang-zhuang |
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| Institution: | Department of Cardiovascular Surgery, Tianjin Chest Hospital, Tianjin, 300051 P. R. China |
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