| 诱导毕赤酵母分泌表达致倦库蚊防御素Defensin成熟肽 |
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| 引用本文： | 吴松泉,雷永良,张凯波,程聪,卢俊婉,罗昊翔. 诱导毕赤酵母分泌表达致倦库蚊防御素Defensin成熟肽[J]. 免疫学杂志, 2013, 0(1): 88-92 |
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| 作者姓名： | 吴松泉 雷永良 张凯波 程聪 卢俊婉 罗昊翔 |
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| 作者单位： | 丽水学院医学院基础医学部;丽水市疾病控制中心 |
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| 摘 要： | 目的诱导毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达表达致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)防御素(defensin)成熟肽,为进一步研究致倦库蚊defensin的抗病原作用、机理及其应用奠定基础。方法利用生物信息和RT-PCR技术克隆了编码致倦库蚊防御素的成熟肽全基因序列,并克隆到毕赤酵母甲醇诱导型分泌表达载体pPICZα-A的α-factor信号肽序列的下游,构建成pPICZα-A-defensin重组表达载体,表达载体经SacⅠ线性化处理后电击转化毕赤酵母X-33感受态细胞,转化子经Zeocin抗性筛选,菌落PCR,Mut表型鉴定和Tricine-SDS-PAGE分析,成功获得了能够有效表达重组defensin的pPICZα-A-Defensin/X-33甲醇利用表型工程菌。结果在甲醇诱导24 h后pPICZα-A-Defensin/X-33的工程菌分泌表达了预期Mr8 200大小的致倦库蚊防御素成熟重组肽。结论致倦库蚊防御素可以在毕赤酵母中诱导分泌表达。
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| 关 键 词： | 防御素 致倦库蚊 毕赤酵母 诱导分泌表达 |
Secretory expression of Culex quinquefasciatus defensin induced in Pichia pastoris |
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| WU Songquan,LEI Yongliang,ZHANG Kaibo,CHENG Cong,LU Junwan,LUO Haoxiang. Secretory expression of Culex quinquefasciatus defensin induced in Pichia pastoris[J]. Immunological Journal, 2013, 0(1): 88-92 |
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| Authors: | WU Songquan LEI Yongliang ZHANG Kaibo CHENG Cong LU Junwan LUO Haoxiang |
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| Affiliation: | 1.Department of Basic Medicine,Medical College of Lishui University,Lishui 323000,China;2.Center for Disease Control of Lishui,Lishui 323000,China |
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