平目汤含药血清对Graves眼病眼眶脂肪细胞FAS、FAS L、CHOP、CASPASE-4蛋白表达的影响

目的研究平目汤对Graves眼病眼眶脂肪细胞FAS、FAS L、CHOP、CASPASE-4蛋白表达的影响,探讨眼眶成熟脂肪细胞凋亡的机制。方法体外培养Graves眼病患者眼眶前脂肪细胞,传代并诱导其分化为成熟脂肪细胞。平目汤含药血清,配成终浓度分别为5%、10%、20%的平目汤低、中、高剂量组。采用MTT法检测前脂肪细胞增殖情况。Western blotting法检测平目汤对眼眶成熟脂肪细胞FAS、FAS L、CHOP及CASPASE-4蛋白表达的影响。结果 (1)MTT法检测结果显示,与空白对照组比较,平目汤低、中、高剂量组的生长曲线显著下移,其中平目汤中剂量组活性下降趋势最明显。地塞米松组与空白对照组差异无统计学意义(P0.05)。相同的时间点与空白对照组比较,平目汤各组OD值均减小,其中以平目汤中剂量组降低最为明显,差异有统计学意义(P0.05)。(2)Western blotting结果显示:与空白对照组比较,除地塞米松组外,各组FAS、FAS L蛋白表达均上调,差异有统计学意义(P0.05),其中FAS蛋白表达以平目汤中剂量组最高,其次为低剂量组,FAS L蛋白表达以平目汤高剂量组最高,其次为中剂量组,但二者比较差异无统计学意义(P0.05)。与空白对照组比较,除地塞米松组外,平目汤各组CHOP、CASPASE-4蛋白表达均上调,差异有统计学意义(P0.05),其中平目汤各组组间比较CHOP蛋白表达以高剂量组最高,其次为中剂量组;CASPASE-4蛋白表达以平目汤中剂量组最高,其次为低剂量组。结论平目汤通过死亡受体途径和内质网途径诱导FAS、FAS L、CHOP、CASPASE-4活化,促进成熟脂肪细胞凋亡,进而减少眼眶脂肪细胞积聚,发挥治疗效果。