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板蓝根含药血清对病毒感染RAW264.7细胞的TLR3信号通路的影响
引用本文:侯宪邦,范方田,何立巍.板蓝根含药血清对病毒感染RAW264.7细胞的TLR3信号通路的影响[J].中国实验方剂学杂志,2017,23(9):105-111.
作者姓名:侯宪邦  范方田  何立巍
作者单位:南京中医药大学 药学院, 南京 210046,南京中医药大学 药学院, 南京 210046,南京中医药大学 药学院, 南京 210046
基金项目:国家自然科学基金项目(81473316);江苏省自然科学基金项目(BK20151356);江苏高校优势学科建设工程项目
摘    要:目的:研究板蓝根含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染RAW264.7细胞中干扰素-β(IFN-β),Toll样受体3(TLR3),TBK1,干扰素调节因子3(IRF3)表达的影响,阐释其可能的抗RSV机制,为临床使用提供实验依据。方法:本实验分为6组,分别为空白组,RSV感染细胞模型组,板蓝根含药血清低、中、高体积分数组(40%,50%,60%板蓝根含药血清),利巴韦林含药血清组(70%利巴韦林含药血清)。除空白组外,其余各组接种RSV造成病毒感染模型,采用板蓝根含药血清或利巴韦林含药血清进行干预,12 h后收集细胞及其上清液,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中IFN-β含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测RAW264.7细胞中TLR3,TBK1,IRF3和IFN-βmRNA的表达;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测TLR3,TBK1,IRF3和p-IRF3蛋白的表达。结果:RSV感染RAW264.7细胞12 h后,与空白组比较,模型组TLR3,TBK1和IFN-βmRNA的表达显著升高,IFN-β,TLR3,TBK1和p-IRF3蛋白的表达也显著升高(P0.01),IRF3 mRNA和蛋白均无明显变化;与模型组比较,板蓝根含药血清中、高体积分数组能够显著下调RSV诱导的TLR3,TBK1和IFN-βmRNA的高表达(P0.05,P0.01),同时明显下调RSV诱导的TLR3,TBK1和p-IRF3蛋白的高表达(P0.05,P0.01),板蓝根含药血清各体积分数组的下调作用低于利巴韦林含药血清组,两者对IRF3 mRNA和蛋白均无明显调控作用。结论:RSV能够诱导TLR3信号转导通路的激活从而促进IFN-β的表达,而板蓝根含药血清通过下调TLR3信号通路关键信号分子TLR3,TBK1,p-IRF3使IFN-β适度表达。

关 键 词:板蓝根  呼吸道合胞病毒  病毒性肺炎  模式识别受体  干扰素-β
收稿时间:2017/1/4 0:00:00

Regulation Effect of Isatidis Radix-containing Serum on TLR3 Signal Transduction Pathway in RAW264.7 Cells Infected With Virus
HOU Xian-bang,FAN Fang-tian and HE Li-wei.Regulation Effect of Isatidis Radix-containing Serum on TLR3 Signal Transduction Pathway in RAW264.7 Cells Infected With Virus[J].China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2017,23(9):105-111.
Authors:HOU Xian-bang  FAN Fang-tian and HE Li-wei
Institution:Pharmacy School, Nanjing University of Chinese Medicine, Nangjing 210046, China,Pharmacy School, Nanjing University of Chinese Medicine, Nangjing 210046, China and Pharmacy School, Nanjing University of Chinese Medicine, Nangjing 210046, China
Abstract:
Keywords:
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