烟酰胺腺嘌呤二核苷酸对精子DNA碎片化指数的影响

目的研究烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)对精子DNA碎片化的作用,并探讨此过程中的分子生物学机制。方法在差异浓度NAD(0、1、10、100、1 000μmol/L)孵育下,观察最适宜的精子NAD孵育浓度;采用Bio Vsion公司生产的NAD/NADH定量试剂盒测定精子NAD水平;采用流式细胞仪观察精子DNA碎片率和染色质成熟度;采用实时定量PCR观察精子DNA单链修复酶PARP1和双链修复酶BRCA1的转录水平。结果 10μmol/L NAD孵育即能显著增加精子NAD含量。在精子内NAD水平显著升高的同时,精子DNA碎片率明显降低,然而精子染色质成熟度不受精子NAD水平的影响。精子内NAD水平能显著影响精子内DNA单链修复酶PARP1和双链修复酶BRCA1的转录水平。结论这些结果初步提示,精子内NAD水平可能通过调节DNA修复系统,参与精子DNA损伤修复。