| 酵母双杂交技术筛查与vasostatin相互作用的蛋白质 |
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| 引用本文： | 赵阳,饶春明,黄鹤,甘一如,王军志. 酵母双杂交技术筛查与vasostatin相互作用的蛋白质[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志, 2008, 15(3): 254-258. DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2008.03.011 |
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| 作者姓名： | 赵阳 饶春明 黄鹤 甘一如 王军志 |
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| 作者单位： | 1. 中国药品生物制品检定所,北京,100050
2. 天津大学化工学院,天津,300072 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) , 天津市自然科学基金 |
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| 摘 要： | 摘 要 目的: 通过酵母双杂交技术筛查与血管生长抑制因子vasostatin相互作用的蛋白质,为进一步阐明其抑制血管生成作用的分子机制奠定基础。方法: 应用第3代酵母双杂交系统，构建vasostatin诱饵质粒，经过表达和自激活验证后筛选预转化的人内皮细胞cDNA文库。将在四缺培养基中筛选得到的阳性克隆提取酵母质粒转化大肠杆菌，进行限制性酶切和测序，寻找可能与vastotatin具有相互作用的蛋白序列。结果： 经过酵母双杂交共获得21个克隆,经过验证,有3个阳性克隆;经过NCBI的BLAST进行同源性分析, 它们的核酸和蛋白序列与已知基因高度同源,它们分别为层黏连蛋白α5（7 547~8 112）和整合素αV（1 257~1 820、316~878）片段，均为重要的配体结合部位。Vasostatin蛋白通过与该区域结合，影响FAK、VEGF和bFGF等的信号通路，抑制血管生成。结论: 酵母双杂交筛选获得的层黏连蛋白和整合素蛋白的3个蛋白片段，它们与肿瘤内血管内皮细胞增殖和迁移等密切相关。
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| 关 键 词： | 酵母双杂交 vasostatin 基因功能 酵母双杂交技术 筛查 vasostatin 相互作用 蛋白质 interacting proteins screening technique 相关 迁移 血管内皮细胞增殖 瘤内 白片 层黏连蛋白α 杂交筛选 抑制血管生成 信号通路 bFGF VEGF 影响 |
| 修稿时间： | 2008-04-15 |
Yeast two hybrid technique in screening for interacting proteins with vasostatin |
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| ZHAO Yang,RAO Chun-ming,HUANG He,GAN Yi-ru and WANG Jun-zhi. Yeast two hybrid technique in screening for interacting proteins with vasostatin[J]. Chinses Journal of Cancer Biotherapy, 2008, 15(3): 254-258. DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2008.03.011 |
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| Authors: | ZHAO Yang RAO Chun-ming HUANG He GAN Yi-ru WANG Jun-zhi |
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| Affiliation: | National Institute for Control of Pharmaceutical and Biological Products,Beijing 100050,China;National Institute for Control of Pharmaceutical and Biological Products,Beijing 100050,China;School of Chemical Engineering,Tianjin University,Tianjin 300072,China;School of Chemical Engineering,Tianjin University,Tianjin 300072,China;National Institute for Control of Pharmaceutical and Biological Products,Beijing 100050,China |
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| Abstract: | |
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