CⅡTA锤头状核酶的克隆及其体外活性 |
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作者姓名: | 何飞 郭荣 杜欣 翁建宇 陆泽生 林伟 |
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作者单位: | 广东省人民医院心内科、广东省心血管病研究所,广州,510080;广东省人民医院血液科,广州,510080 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;广东省人民医院科研项目;广东省医学科学技术研究基金;广东省自然科学基金 |
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摘 要: | 通过CⅡTA核酶抑制HeLa细胞表面MHC Ⅱ类分子的表达.设计并合成针对人类CⅡTA的核酶Rz464,通过体外转录和切割实验鉴定其活性.将Rz464亚克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP(pRz464),并稳定转染HeLa细胞株,流式细胞术检测MHC Ⅱ类抗原表达,RT-PCR检测CⅡTA mRNA水平.结果表明,Rz464与CⅡTA靶序列体外切割产物电泳见预期切割条带.pRz464+HeLa细胞与对照组比较,HLA-DR、DP、DQ抗原诱导型表达分别降低了79.21%、90.31%及48.30%;同时CⅡTA的诱导型mRNA含量明显减少.Rz464通过切割CⅡTA mRNA,进而阻止了后者调控的MHC Ⅱ类分子的表达.
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关 键 词: | MHC Ⅱ类反式激活因子(CⅡTA) 核酶 锤头状 移植免疫 |
文章编号: | 1001-2478(2007)03-0207-05 |
修稿时间: | 2006-12-07 |
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