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CⅡTA锤头状核酶的克隆及其体外活性
作者姓名:何飞  郭荣  杜欣  翁建宇  陆泽生  林伟
作者单位:广东省人民医院心内科、广东省心血管病研究所,广州,510080;广东省人民医院血液科,广州,510080
基金项目:国家自然科学基金;广东省人民医院科研项目;广东省医学科学技术研究基金;广东省自然科学基金
摘    要:通过CⅡTA核酶抑制HeLa细胞表面MHC Ⅱ类分子的表达.设计并合成针对人类CⅡTA的核酶Rz464,通过体外转录和切割实验鉴定其活性.将Rz464亚克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP(pRz464),并稳定转染HeLa细胞株,流式细胞术检测MHC Ⅱ类抗原表达,RT-PCR检测CⅡTA mRNA水平.结果表明,Rz464与CⅡTA靶序列体外切割产物电泳见预期切割条带.pRz464+HeLa细胞与对照组比较,HLA-DR、DP、DQ抗原诱导型表达分别降低了79.21%、90.31%及48.30%;同时CⅡTA的诱导型mRNA含量明显减少.Rz464通过切割CⅡTA mRNA,进而阻止了后者调控的MHC Ⅱ类分子的表达.

关 键 词:MHC Ⅱ类反式激活因子(CⅡTA)  核酶  锤头状  移植免疫
文章编号:1001-2478(2007)03-0207-05
修稿时间:2006-12-07
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