人SIK2重组质粒的构建和真核细胞转染 |
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引用本文: | 谭伟,王豫,刘晓丹,黄波,顾永清,周平坤,让蔚清. 人SIK2重组质粒的构建和真核细胞转染[J]. 实用预防医学, 2013, 20(5) |
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作者姓名: | 谭伟 王豫 刘晓丹 黄波 顾永清 周平坤 让蔚清 |
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作者单位: | 1. 南华大学公共卫生学院环境医学与放射卫生研究所 湖南衡阳421001 2. 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 3. 南华大学公共卫生学院环境医学与放射卫生研究所 湖南衡阳421001;军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
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基金项目: | 国家863项目,国家自然科学基金项目 |
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摘 要: | 目的 构建人SIK2基因真核表达载体.方法 利用PCR扩增目的基因SIK2,PCR产物经纯化后与pC-MV-Tag 2B线性质粒进行连接,连接产物转化大肠杆菌DH5α,涂卡那抗性琼脂糖平板;菌落PCR、酶切及测序鉴定阳性克隆后,抽提质粒,利用Lipofectamnie 2000TM试剂瞬转293T细胞,24 h后,Western Blot方法检测其在真核细胞内的表达.结果 成功构建pCMV Tag-2B-SIK2重组质粒,并在真核细胞内成功表达.结论 SIK2外源表达载体的构建成功,为进一步研究其功能奠定了实验基础.
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关 键 词: | SIK2 重组质粒 蛋白表达 |
Construction of Human Recombinant Plasmid of pCMV-Tag-2B-SIK2 and its Expression in Eukaryotic Cells |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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