| 大鼠椭圆囊感觉上皮细胞长期培养体系的建立及毛细胞标记物表达的意义 |
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| 引用本文： | 刘俊,孔维佳.大鼠椭圆囊感觉上皮细胞长期培养体系的建立及毛细胞标记物表达的意义[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志,2009,23(19):889-893. |
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| 作者姓名： | 刘俊 孔维佳 |
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| 作者单位： | 1. 浙江省中医院耳鼻咽喉科,杭州,310006
2. 华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科 |
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| 基金项目： | 国家杰出青年基金，卫生部临床学科重点项目 |
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| 摘 要： | 目的：建立椭圆囊感觉上皮细胞（USEC）长期培养体系，为内耳毛细胞再生研究提供稳定的活性细胞。方法：取1d龄wistar大鼠，在显微镜下取出椭圆囊上皮，嗜热菌蛋白酶处理，获得具活性的纯椭圆囊感觉上皮，胰蛋白酶＋胶原酶消化，培养传代，传25代。取第25代USEC在倒置显微镜、透射电镜下对USEC的生长特征、形态结构进行观察；免疫细胞化学检测细胞角蛋白18、波形蛋白、Brn3．a及Calretinin的表达。RT—PCR检测毛细胞的特征性标记物AchRa9、MyosinVIIamRNA的表达。结果：USEC细胞培养达6个月传25代，第25代USEC均呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态，细胞之间连接紧密，形成单层时均呈“铺路石样”外观，可见dome结构。该细胞表达角蛋白18和不表达波形蛋白，微绒毛丰富，细胞间连接紧密，提示其上皮起源。第25代USEC表达毛细胞的特征性标志物Brn3．a、Calretinin及AchRa9、Myosin Ⅶa mRNA，表明长期培养USEC仍具有毛细胞的前体细胞的特性。结论：本实验成功建立了USEC长期培养体系。长期培养的USEC性状未发生明显改变，表达上皮细胞及毛细胞的特征性标志物，具有毛细胞前体细胞的特征。这为毛细胞再生的机制及内耳分子、基因研究提供了稳定的细胞来源。
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| 关 键 词： | 椭圆囊 感觉上皮 长期培养 毛细胞 |
Long-term culture of utricular sensory epithelial cell of rats and expression of the hair cell characteristic markers |
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| LIU Jun,KONG Weijia.Long-term culture of utricular sensory epithelial cell of rats and expression of the hair cell characteristic markers[J].Journal of Clinical Otorhinolaryngology,2009,23(19):889-893. |
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| Authors: | LIU Jun KONG Weijia |
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| Institution: | LIU Jun KONG Weijia (1Department of Otolaryngology, Hospital of Traditional Chinese Medicine of Zhejiang Province, Hangzhou, 310006, China;2 Department of Otolaryngology, the Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | utricular sensory epithelial long-term culture hair cell |
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