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| MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的制备及其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用 | |
| 引用本文： | 刘新建,徐 萍,钱其军,黄 倩. MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的制备及其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志, 2010, 17(4): 386-391. DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2010.04.005 |
| 作者姓名： | 刘新建 徐 萍 钱其军 黄 倩 |
| 作者单位： | 1. 上海交通大学,癌基因及相关基因国家重点实验室,上海,200032;上海交通大学,生命科学技术学院,上海,200240;复旦大学,附属眼耳鼻喉科医院,实验中心,上海,200032 2. 复旦大学,附属眼耳鼻喉科医院,实验中心,上海,200032 3. 第二军医大学,东方肝胆外科医院,基因-病毒治疗实验室,上海,200438 4. 上海交通大学,附属第一人民医院中心实验室,上海,200080 |
| 基金项目： | 癌基因及相关基因国家重点实验室开放课题（No. 80-07-03） |
| 摘 要： | 目的：构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒，制备MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白，研究该融合蛋白在肿瘤细胞内的定位及其对肿瘤细胞致凋亡作用。方法：PCR扩增MDA-7/IL-24基因，插入含有HaloTag (HT7)标签的载体中，构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒；MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白经IPTG诱导表达后纯化。利用带有荧光标记的HT7配基观察MDA-7/IL-24-HT7在肿瘤细胞内的定位。MTT法及AnnexinV-PI染色法检测MDA-7/IL-24-HT7对肿瘤细胞生长和凋亡的影响。结果：成功构建了表达MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的原核及真核表达质粒，MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白主要存在于E.coli BL21的包涵体内。MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白定位于肿瘤细胞的内质网上。MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞的生长，1 mg/ml MDA-7/IL-24-HT7 融合蛋白作用大肠癌HCT116细胞、肝癌SMMC7721细胞96 h后，细胞凋亡率分别为（34.7±1.3）% 和（22.1±0.9）%，显著高于未处理的肿瘤细胞（P<0.01）。结论：带有HaloTag标签的MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡。 |
| 关 键 词： | MDA-7/IL-24；HaloTag；融合蛋白；肝肿瘤；大肠肿瘤；凋亡 |
| 收稿时间： | 2010-04-15 |
| 修稿时间： | 2010-05-18 |
Preparation of MDA-7/IL-24-HT7 fusion protein and its apoptosis inducing activity on tumor cells |
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| LIU Xin-jian,XU Ping,QIAN Qi-jun and HUANG Qian. Preparation of MDA-7/IL-24-HT7 fusion protein and its apoptosis inducing activity on tumor cells[J]. Chinses Journal of Cancer Biotherapy, 2010, 17(4): 386-391. DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2010.04.005 | |
| Authors: | LIU Xin-jian XU Ping QIAN Qi-jun HUANG Qian |
| Abstract: | |
| Keywords: | MDA-7/IL-24 HaloTag fusion protein liver neoplasmas colon neoplasmas apoptosis |
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