银杏叶提取物对NF-κB活性抑制人视网膜色素上皮细胞炎症反应的影响

目的:观察银杏叶提取物对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19炎症的影响及核转录因子-kappaB(NF-κB)通路的变化,探讨其作用机制。方法:体外培养ARPE-19细胞株,分为正常组(5.5 mmol·L-1葡萄糖),高糖组(30 mmol·L-1葡萄糖),银杏叶提取物不同剂量组组(30 mmol·L-1葡萄糖+12.5,25,50,100 mg·L-1银杏叶提取物)。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;流式细胞术测定细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)测定炎症因子(NIK/p-NIK,IKKα/p-IKKα,IκB/p-IκB)表达;Western blot检测NF-κB磷酸化及核NF-κB表达。结果:与正常组比较,高糖组吸光度A明显降低(P0.05),细胞TNF-α,IL-1β含量明显升高(P0.05),p-NIK,p-IKKα,p-IκB表达水平明显升高(P0.05),p-NF-κB,核NF-κB表达水平明显升高(P0.05);与高糖组比较,12.5,25,50,100 mg·L-1银杏叶提取物组吸光度A明显升高(P0.05);细胞TNF-α,IL-1β含量明显降低(P0.05),p-NIK,p-IKKα,p-IκB水平明显降低(P0.05),p-NF-κB,核NF-κB表达水平明显降低(P0.05)。结论:银杏叶提取物能通过抑制NF-κB活性抑制炎症反应,保护视网膜色素上皮细胞,用于糖尿病视网膜病变的防治。