小分子干扰RNA沉默髓样细胞触发受体1对内毒素诱导小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌炎性因子的影响 |
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作者姓名: | 邹海鹏 马晓鹂a 张良清b 厉婷a |
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作者单位: | 1.广东医学院药理学教研室,广东湛江524023;2.广东医学院附属医院,a.药学部;b.麻醉科,广东湛江524001 |
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基金项目: | 广东省社会发展重点引导项目(2009B030801335) |
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摘 要: | 目的利用小分子干扰RNA探讨髓样细胞触发受体1在内毒素刺激小鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β中的作用。方法设计并合成干扰率高的小分子干扰RNA,以pLKO1.1为载体构建pLKO1.1-髓样细胞触发受体1干扰质粒。将小鼠巨噬细胞株RAW264.7分为4组:空白组;内毒素组;空质粒组(pLKO1.1组):采用脂质体法将pLKO1.1转染细胞;干扰组(小分子干扰RNA组):将pLKO1.1-髓样细胞触发受体1转染细胞,内毒素刺激24h后实时定量PCR分别检测髓样细胞触发受体1、肿瘤坏死因子α与白细胞介素1β的mRNA水平;以ELISA法分别检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β含量。结果与内毒素组比较,小分子干扰RNA组细胞中髓样细胞触发受体1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β的mRNA含量显著下降(P<0.01);细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β含量明显降低(P<0.01)。结论小分子干扰RNA可能通过抑制髓样细胞触发受体1基因的表达而减少内毒素诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β的分泌。
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关 键 词: | 髓样细胞触发受体1 小分子干扰RNA 内毒素 小鼠巨噬细胞 肿瘤坏死因子α 白细胞介素1βdoi:10.11669/cpj.2013.09.009 |
收稿时间: | 2013-06-06; |
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