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乳腺癌HER2基因扩增检测方法——显色原位杂交法的应用及优化
引用本文:倪灿荣,白辰光. 乳腺癌HER2基因扩增检测方法——显色原位杂交法的应用及优化[J]. 第二军医大学学报, 2008, 29(1): 0099-0102
作者姓名:倪灿荣  白辰光
作者单位:第二军医大学长海医院病理科,上海,200433;第二军医大学长海医院病理科,上海,200433
摘    要:目的:应用显色原位杂交技术(chromogenic in situ hybridization,CISH)检测乳腺癌组织人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)基因扩增情况,并对操作方法进行优化.方法:选择免疫组织化学(IHC)EnVision法检测结果2 及以上的60例乳腺癌组织作为研究对象,应用CISH技术检测其HER2基因扩增情况,分析二者结果的相关性;总结CISH操作经验,优化操作方法.结果:44例标本IHC检测HER2蛋白表达为3 ,其中40例CISH检测呈现HER2基因高倍扩增,4例无扩增;基因扩增与蛋白表达的符合率为91%.16例IHC检测HER2表达为2 标本基因扩增与蛋白表达的符合率为50%.IHC与CISH符合率为80%(48/60),二者明显相关(P<0.01).操作过程中应严格控制切片厚度,一般要求4~5 μm;杂交变性一定要彻底,杂交后的洗涤温度和时间也很重要,最好控制在70~75℃;要严格控制苏木精衬染时间;每次实验最好有阳性对照片,可以有效进行质量控制.结论:CISH检测乳腺癌HER2基因扩增的结果与IHC检测的蛋白表达结果符合率较高,可作为乳腺癌HER2基因检测的一项新技术;但在具体操作时,应注意严格控制切片厚度、消化及杂交后洗涤温度与时间以及苏木精衬染时间等因素.

关 键 词:显色原位杂交技术  乳腺肿瘤  人表皮生长因子受体2  c-erbB-2基因
文章编号:0258-879X(2008)01-0099-04
收稿时间:2007-08-20
修稿时间:2008-01-07

A method for detection of HER2 gene amplification in breast cancer tissues: chromogenic in situ hybridization method and its modification
NI Can-rong,BAI Chen-guang. A method for detection of HER2 gene amplification in breast cancer tissues: chromogenic in situ hybridization method and its modification[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2008, 29(1): 0099-0102
Authors:NI Can-rong  BAI Chen-guang
Affiliation:Department of Pathology, Changhai Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China
Abstract:
Keywords:chromogenic in situ hybridization  breast neoplasms  human epidermal growth factor receptor 2  c-erbB-2 gene
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