| PCR-RFLP鉴别微小按蚊亲缘种A和C |
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| 引用本文： | 周水森,汤林华,薛海筹,夏明仪.PCR-RFLP鉴别微小按蚊亲缘种A和C[J].中国病原生物学杂志,2003,16(6):332-334. |
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| 作者姓名： | 周水森 汤林华 薛海筹 夏明仪 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,上海,200025 |
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| 摘 要： | 目的 建立微小按蚊复合体不同亲缘种A和C的分子鉴别方法—PCR产物酶切片段长度多态性分析 (PCR RFLP)。 方法 用单蚊蚊腿消化提取基因组DNA ,PCR特异扩增核糖体 2 8S第 3结构域 (D3 )基因 ,对PCR产物进行纯化、克隆和测序 ;分析微小按蚊A和CD3基因的酶切图谱 ,选择合适的限制性内切酶对两者PCR产物进行特异性切割 ,按照酶切片段长度区分两亲缘种。 结果 微小按蚊A被限制性内切酶MboII切割后在约 3 76bp、2 68bp和 10 8bp处出现 3条条带 ,而微小按蚊C因第 96bp、97bp位点突变 ,不存在限制性内切酶MboII的特异识别位点而未被消化 ,仅在 3 76bp处存在唯一条带。 结论 本实验建立的PCR RFLP分子鉴别方法能有效地将形态难以鉴别的微小按蚊亲缘种A和C(GenBank :AF416782 ,AF415 5 94)区分开来。
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| 关 键 词： | 微小按蚊 亲缘种 D3基因 分子鉴别 |
| 文章编号： | 1001-6627(2003)06-0332-03 |
| 修稿时间： | 2003年5月22日 |
ESTABLISHMENT OF PCR-RFLP METHOD BASED ON 28S-D3 REGION OF RIBOSOIBOSOMAL DNA FOR DIFFERENTIATION OF ANOPHELES MINIMUS A AND C |
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| ZHOU Shui-sen,TANG Lin-hua,XUE Hai-chou,XIA Ming-yi.ESTABLISHMENT OF PCR-RFLP METHOD BASED ON 28S-D3 REGION OF RIBOSOIBOSOMAL DNA FOR DIFFERENTIATION OF ANOPHELES MINIMUS A AND C[J].Journal of Pathogen Biology,2003,16(6):332-334. |
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| Authors: | ZHOU Shui-sen TANG Lin-hua XUE Hai-chou XIA Ming-yi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Anopheses minimus sibling species rDNA-28S-D3 gene molecular differentiation method |
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