| 人毛乳头细胞凝集性生长差异表达基因cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 宋志强,郝飞,杨希川,杨卫兵,程波,麦跃,叶庆佾. 人毛乳头细胞凝集性生长差异表达基因cDNA文库的构建[J]. 第三军医大学学报, 2003, 25(11): 1004-1008 |
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| 作者姓名： | 宋志强 郝飞 杨希川 杨卫兵 程波 麦跃 叶庆佾 |
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| 作者单位： | 第三军医大学附属西南医院皮肤科,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 ( 30 2 0 0 2 4 9)，重庆市科委攻关重点课题 ( 2 0 0 1- 8- 4) |
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| 摘 要： | 目的 构建毛乳头细胞凝集性生长状态下差异表达基因的消减cDNA文库。方法 分别提取凝集性生长和非凝集性生长状态下毛乳头细胞中的总RNA，应用SMART cDNA合成技术和抑制性消减杂交技术分离毛乳头细胞凝集性生长状态下差异表达基因的cDNA片段并建立消减cDNA文库；利用PCR对随机挑选的100个白色菌落进行插入片段的验证，对其中证实有插入片段的30个克隆进行cDNA斑点杂交验证。结果 所构建的消减cDNA文库扩增后得到320个阳性克隆，随机挑选的100个阳性克隆中95％的均有长度在100—600bp的插入片段，cDNA斑点杂交验证显示27个(90．0％)克隆为阳性。结论 结合SMART cDNA合成技术，应用抑制性消减杂交成功地构建了毛乳头细胞凝集性生长差异表达基因消减cDNA文库，为进一步筛选和克隆毛乳头细胞凝集性生长相关基因奠定了基础。
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| 关 键 词： | 毛乳头细胞 抑制性消减杂交 文库 |
| 文章编号： | 1000-5404(2003)11-1004-05 |
| 修稿时间： | 2002-07-01 |
Construction and identification of a differentially expressed genes subtracted cDAN library of human dermal papillae cells with aggregative behavior |
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| SONG Zhi qiang,HAO Fei,YANG Xi chuan,YANG Wei bing,CHENG Bo,MAI Yue,YE Qing yi. Construction and identification of a differentially expressed genes subtracted cDAN library of human dermal papillae cells with aggregative behavior[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2003, 25(11): 1004-1008 |
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| Authors: | SONG Zhi qiang HAO Fei YANG Xi chuan YANG Wei bing CHENG Bo MAI Yue YE Qing yi |
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| Keywords: | dermal papilla cell suppression subtractive hybridization library |
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