甲状腺滤泡细胞的自噬活性参与慢性淋巴细胞性甲状腺炎的发病机制

目的探讨甲状腺滤泡细胞自噬对慢性淋巴细胞性甲状腺炎( CLT)的影响及炎性因子干扰素 ?γ(IFN?γ)对甲状腺滤泡细胞自噬参与 CLT的作用。方法 2018年 1—7月，选取新疆喀什地区第二人民医院 24例 CLT甲状腺切除的病人作为 CLT组，并选择同期入院的 24例单纯甲状腺肿( SG)甲状腺切除病人作为 SG组；对人甲状腺滤泡细胞分离、培养、鉴定；流式细胞技术检测甲状腺组织中 CD3+T细胞占比；放射性免疫法检测甲状腺滤泡细胞三碘甲状腺原氨酸( T3)、甲状腺素( T4)、甲状腺球蛋白(Tg)的水平，酶联免疫吸附试验( ELISA)试剂盒检测 IFN?γ、环磷酸腺苷( cAMP)水平；蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白 Be? cline、微管相关蛋白 1轻链 3?Ⅱ(LC3B?Ⅱ)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( mTOR)及不同浓度 IFN?γ对 Becline、LC3B?Ⅱ、mTOR蛋白的影响。结果成功分离出人甲状腺滤泡上皮细胞，倒置显微镜下观察，可见人甲状腺滤泡细胞在贴壁之前呈圆形或椭圆形或不规则形状， CLT病人组织切片可见多个淋巴生发中心，大量淋巴细胞浸润，甲状腺滤泡细胞萎缩。 SG病人甲状腺组织甲状腺滤泡细胞未见明显炎症浸润。流式细胞分析结果显示， CLT组甲状腺滤泡上皮细胞内浸润的 CD3+淋巴细胞数所占百分比( 25.76±4.05)%明显高于 SG组( 10.35±4.21)%，两组间比较差异有统计学意义( n＝24，P＜0.001)。与 SG组比较， CLT组中 T3、T4、Tg、INF?γ及 cAMP水平［甲状腺组织:(6.70±0.32)nmol/L，(44.05±0.39)nmol/L，(0.65±0.01)μg/L，(15.84±1.43)μg/L，(3.680±0.046)μmol/L；血清:(9.89±0.32)nmol/L，(39.25±0.27)nmol/L，(1.86±0.42)μg/L，(16.32±0.31)μg/L，(4.325±0.012)μmol/L］均升高，差异有统计学意义。 CLT组织与 SG组织相比自噬水平低下，表现为 Becline，LC3B?Ⅱ蛋白低表达［Becline蛋白:(7.16±0.15)； LC3B?Ⅱ蛋白:(0.82±0.01)］，mTOR蛋白高表达( 12.26±0.16)。 IFN?γ干预后，甲状腺滤泡细胞中自噬蛋白 Be? cline，mTOR，LC3B?Ⅱ被诱导，表现为 Becline，LC3B?Ⅱ水平高表达［250 U/mL组:(7.80±0.07)，(1.51±0.05)； 500 U/mL组:(8.50±0.10)，(1.82±0.04)； 1 000 U/mL:(9.16±0.14)(2.47±0.09)］mTOR水平低表达［250 U/mL组:(12.26±0.16)； 500 U/mL组:(0.84±0.13)； 1 000 U/mL组:(9.66±0.07)］N?γ浓度的诱导作用愈明显。结论甲状腺滤泡细胞自噬参与 CLT的发展，且作用机制可能与炎性因子 IFN?γ关。

The autophagy activity of thyroid follicular cells participates in the pathogenesis of chronic lymphocytic thyroiditis