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骨髓间充质干细胞旁分泌胰岛素样生长因子1促受损肝L02细胞增殖的效应及其分子机制
引用本文:冯吉,熊吉,熊全,陈潇迪,王斌,陈东风. 骨髓间充质干细胞旁分泌胰岛素样生长因子1促受损肝L02细胞增殖的效应及其分子机制[J]. 中华肝脏病杂志, 2012, 20(11)
作者姓名:冯吉  熊吉  熊全  陈潇迪  王斌  陈东风
作者单位:第三军医大学大坪医院野战外科研究所消化内科,重庆,400042
基金项目:重庆市科委重点自然基金,第三军医大学临床科研课题
摘    要:目的 探讨骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)旁分泌胰岛素样生长因子1(IGF-1)促受损肝L02细胞增殖作用的分子机制. 方法 利用Transwell小室建立MSCs与D-氨基半乳糖(D-GalN)损伤L02肝细胞的非接触式共培养模型,四甲基偶氮唑盐法检测BM-MSCs对D-GalN损伤组L02细胞增殖的影响,酶联免疫吸附法检测共培养体系中IGF-1的表达水平及其主要来源细胞,Western blot 检测损伤L02细胞的IGF-1受体(IGF-IR)表达水平及外源性和BM-MSCs源性IGF-1对D-GalN损伤L02细胞增殖的影响.两组间数据比较采用t检验,两组以上数据的比较采用方差分析. 结果 共培养条件下的BM-MSCs能非接触依赖性地促进D-GalN损伤组L02细胞增殖,其在24、48、72 h的吸光度值分别为0.60±0.09、0.82±0.05、0.90±0.06,明显高于D-GalN损伤组在相应时间点的0.36±0.08、0.52±0.06、0.68±0.06(t值分别为2.493、3.116、2.285,P值均<0.05).经D-GalN损伤组L02细胞分泌上清液处理48 h的BM-MSCs的IGF-1分泌量为(156±24) ng/ml,与D-GalN损伤组L02细胞共培养48 h的BM-MSC IGF-1分泌量为(185±36) ng/ml,均较正常BM-MSCs分泌量(19±9)ng/ml明显上升(t值分别为5.345和4.473,P值均<0.01).外源性rh-IGF-1能明显促进L02细胞增殖,且在160 ng/ml时达到最大效应,处理D-GalN损伤L02细胞96h的吸光度值为1.70±0.09,明显高于rh-IGF-1浓度0 ng/ml组的0.79±0.09(t=9.460,P<0.05).BM-MSCs与D-GalN损伤L02细胞共培养组在加入IGF-1R单克隆抗体处理前后,24、48、72 h时的吸光度值分别为1.80±0.11比1.30±0.16、1.70±0.12比1.30±0.10、1.69±0.11比1.25±0.12,IGF-1R单克隆抗体处理后的L02细胞增殖明显被抑制(t值分别为2.909、2.328、2.560,P值均<0.05).结论 BM-MSCs源性IGF-1通过结合损伤L02细胞的IGF-1R,在BM-MSCs的旁分泌促受损肝L02细胞增殖中发挥主要作用.

关 键 词:间质干细胞  骨髓细胞  胰岛素样生长因子1  细胞增殖  L02细胞

Insulin-like growth factor-1-mediated paracrine pro-proliferative effect of bone marrow mesenchymal stem cells on injured L02 hepatocytes
FENG Ji , XIONG Ji , XIONG Quan , CHEN Xiao-di , WANG Bin , CHEN Dong-feng. Insulin-like growth factor-1-mediated paracrine pro-proliferative effect of bone marrow mesenchymal stem cells on injured L02 hepatocytes[J]. Chinese journal of hepatology, 2012, 20(11)
Authors:FENG Ji    XIONG Ji    XIONG Quan    CHEN Xiao-di    WANG Bin    CHEN Dong-feng
Abstract:
Keywords:Mesenchymal stem cells  Bone marrow cells  Insulin-like growth factor 1  Cell proliferation  L02 cell
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