神经干细胞联合神经生长因子纳米粒海马移植对APP/PS1转基因小鼠行为学及海马突触素的影响

目的 观察神经干细胞（NSCs）联合神经生长因子（NGF）纳米粒海马移植对APP/PS1双转基因小鼠行为学及海马突触素（SYP）的影响。 方法 体外分离培养增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转基因小鼠胎脑来源NSCs，24只12月龄雄性APP/PS1双转基因AD小鼠随机分入NSCs联合NGF纳米粒移植组（NSCs+NGF-NP组）、NSCs移植组（NSCs组）和AD对照组（AD组），每组8只，另选8只同月龄雄性野生型小鼠作为健康对照组（WT组）。NSCs+NGF-NP组和NSCs组分别行NSCs联合NGF纳米粒移植和NSCs移植，其余两组均行等量磷酸盐缓冲液（PBS）注射，移植部位为双侧海马区。移植4周后，采用Morris水迷宫检测4组小鼠学习记忆功能，用免疫荧光组化法检测移植细胞的迁移与分化，Western blot检测SYP蛋白水平。 结果 体外悬浮培养的神经球表达EGFP阳性,免疫荧光显示NSCs特异性标志物Nestin阳性。移植4周后，可见EGFP示踪的NSCs在海马注射移植部位存活并向胼胝体，海马深部和齿状回迁移，可分化为双皮质素（DCX）阳性神经元及胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性胶质细胞，并可见NSCs+NGF-NP组存活细胞数量较多，突起较长，穿越海马颗粒层。海马突触相关蛋白SYP检测显示， WT组、NSCs组和NSCs+NGF-NP组海马SYP蛋白水平较AD组明显增高（P＜0.05），NSCs+NGF-NP组SYP蛋白水平明显高于NSCs组（P＜0.05），且与WT组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。水迷宫检测显示，与AD组比较，WT组、NSCs组和NSCs+NGF-NP组在平台象限停留时间及穿越平台次数均增加（P＜0.05），NSCs+NGF-NP组穿越平台的次数大于NSCs组（P＜0.05），且与WT组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 NSCs联合NGF纳米粒海马移植治疗可能促进移植细胞在体内存活及成熟，增加海马突触，从而改善AD小鼠学习记忆功能。