砷暴露及雌激素受体拮抗剂对雌、雄胎鼠AECⅡ内ERβ表达的影响

目的 观察砷暴露及雌激素受体拮抗剂（ICI182,780）对雌、雄胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）内雌激素受体β（ERβ）表达的影响。方法 孕19~20 d ICR小鼠剖腹取胎鼠，分离、纯化雌性组和雄性组胎鼠AECⅡ。四甲基亚唑蓝（MTT）法确定亚砷酸钠(NaAsO₂）染毒AECⅡ细胞的剂量。将AECⅡ细胞分为以不同剂量（低、中、高）NaAsO₂染毒的砷暴露组，培养24 h；另取AECⅡ细胞为联合暴露组，分别加入二甲基亚砜（DMSO）（溶剂对照组）、NaAsO₂ 5 μmol/L（单独砷染毒组）、NaAsO₂（5 μmol/L）+ICI182,780（1×10-4 mol/L）（砷+拮抗剂组），培养24 h；均设空白对照组（不加任何试剂）。24 h后，砷暴露组行流式细胞术测凋亡率，砷暴露组、联合暴露组行实时荧光定量PCR法和Western blot检测胎鼠AECⅡ内ERβ mRNA和蛋白的表达水平。结果 AECⅡ纯度达（87.0±2.5）%。MTT法将0.5（低）、1.25（中）、5（高） μmol/L的浓度设置为染毒剂量。砷暴露组中:雌、雄中、高剂量组细胞凋亡率均高于空白对照组（P<0.05），而雌、雄各剂量组间比较差异无统计学意义。雌性中、高剂量组ERβ mRNA和蛋白表达水平高于空白对照组（P<0.05）和同剂量组雄性（P<0.05）；雄性各剂量组ERβ mRNA和蛋白表达水平与空白对照组比较差异无统计学意义。联合暴露组中:雌性单独砷染毒组ERβ mRNA和蛋白表达水平高于砷+拮抗剂组（P<0.01）及同剂量组雄性（P<0.05），且高于空白对照组和溶剂对照组（P<0.05），雄性各组间比较差异无统计学意义；雌、雄其余各组间比较差异无统计学意义。结论 砷暴露可使雌性胎鼠AECⅡ内ERβ表达上调且高于雄性，此过程可被雌激素受体拮抗剂阻断。