干扰UCA1及抑制miR-185-5p对非小细胞肺癌β-Catenin通路的活化、自噬和存活影响

目的探究在非小细胞肺癌中，长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）尿路上皮癌抗原1（urothelial carcinoma associated 1，UCA1）敲降miR-185-5p对 β-Catenin通路的影响。方法选取非小细胞肺癌A549细胞为研究材料，设置A549空白对照组、sh-scramble阴性对照组、sh-UCA1干扰组、miR-185 inhibitor组和sh-UCA1+ inhibitor组。Western blot验证体系中增殖、凋亡和自噬相关分子表达；qRT-PCR鉴定体系中lncRNA UCA1和miR-185-5p的表达；生物信息学软件和荧光素酶实验检测lncRNA UCA1和miR-185-5p之间结合性。BrdU染色鉴定细胞增殖，免疫荧光染色检测细胞中LC3+细胞含量。结果在A549细胞中，lncRNA UCA1干扰后，UCA1表达量显著下降并促进miR-185-5p表达，有效抑制肺癌细胞增殖和自噬，促进凋亡发生（P<0.01）；经生物信息学和双荧光素酶报告系统验证lncRNA UCA1和miR-185-5p有较强结合性；并进一步验证lncRNA UCA1可以有效抑制β-Catenin/TCF-4及Beclin 1和LC3 Ⅱ表达，降低miR-185-5p对肺癌细胞增殖和自噬效果，减少细胞内LC3含量（P<0.01）。结论lncRNA UCA1干扰后，可以有效降低UCA1对miR-185-5p的抑制效果，进而解除β-Catenin/TCF-4、Beclin 1和LC3 Ⅱ受到的抑制作用，从而减少肺癌细胞自噬发生和减缓增殖。