| Mda7/IL-24基因的克隆及其融合蛋白在E.coli中的表达 |
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| 引用本文： | 马群风,江红,刘锟,朱捷,郑晓飞. Mda7/IL-24基因的克隆及其融合蛋白在E.coli中的表达[J]. 军事医学科学院院刊, 2004, 28(3): 221-224 |
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| 作者姓名： | 马群风 江红 刘锟 朱捷 郑晓飞 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学唐都医院胸外科,西安,710038
2. 军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850 |
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| 摘 要： | 目的 :克隆人黑素瘤分化相关基因 (melanomadifferentiationassociatedgene ,mda 7/IL 2 4 ) ,并在大肠杆菌中表达。方法 :从PHA刺激培养的人外周血淋巴细胞提取总RNA ,根据mda 7/IL 2 4基因序列设计引物 ,用PCR法扩增mda 7/IL 2 4基因。将mda 7/IL 2 4基因插入表达载体pET 2 8a(+)中 ,构建表达载体pET 2 8a mda 7/IL 2 4 ,用IPTG诱导目的蛋白在E .coli中表达。通过Western印迹分析对表达产物进行鉴定。结果 :经RT PCR从人外周血分离的淋巴细胞中扩增到mda 7/IL 2 4cDNA ,序列分析与文献报道一致 ;SDS PAGE分析表明 ,经 0 .5mmol/LIPTG 37℃诱导 4h后在E .coli中有大量mda 7/IL 2 4融合蛋白表达 ,相对分子质量约为 2 8× 10 3 ,融合蛋白约占诱导菌总蛋白的30 % ;Western印迹分析提示 ,诱导表达产物能与His单抗发生特异性反应。结论 :从人外周血淋巴细胞中获得了mda 7/IL 2 4的全长cDNA ,融合蛋白在E .coli中获得高效表达。
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| 关 键 词： | 人白细胞介素24 基因克隆 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-5501(2004)03-0221-04 |
Cloning of human interleukin 24(mda7/IL-24) gene and its fusion protein expression in E.coli |
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| MA Qun-Feng ,JIANG Hong ,LIU Kun ,ZHU Jie ,ZHENG Xiao-Fei. Cloning of human interleukin 24(mda7/IL-24) gene and its fusion protein expression in E.coli[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2004, 28(3): 221-224 |
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| Authors: | MA Qun-Feng JIANG Hong LIU Kun ZHU Jie ZHENG Xiao-Fei |
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| Affiliation: | MA Qun-Feng 2,JIANG Hong 1,LIU Kun 2,ZHU Jie 1,ZHENG Xiao-Fei 1* |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human interleukin-24 gene cloning gene expression |
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