| MAGE-A4重组蛋白的原核表达与纯化 |
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| 引用本文： | 雕丽琼,薛莹,石梅,柴广金,穆允凤,王丽梅.MAGE-A4重组蛋白的原核表达与纯化[J].解放军预防医学杂志,2013,31(2):109-112. |
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| 作者姓名： | 雕丽琼 薛莹 石梅 柴广金 穆允凤 王丽梅 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院放疗科,西安,710032
2. 第四军医大学基础部微生物教研室 |
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| 摘 要： | 目的 构建MAGE-A4的原核表达质粒并表达纯化相应蛋白,为恶性肿瘤的早期诊断和基因治疗疫苗的研制奠定基础.方法 根据目的基因序列合成目的基因并与原核表达载体连接,以构建原核表达质粒pET30a(+)/MAGE-A4,将酶切鉴定及测序正确的重组质粒转入E.coli BL21,经IPTG诱导表达并行可溶性分析,Western Blot鉴定重组蛋白特异性后,通过亲和层析法纯化重组蛋白.结果 成功构建pET30a (+)/MAGE-A4原核表达质粒,诱导表达得到重组蛋白MAGE-A4,主要以可溶性形式表达,纯化后获得纯度较高的蛋白.结论 成功构建pET30a(+)/MAGE-A4原核表达质粒并表达纯化出具有生物学活性的重组蛋白MAGE-A4.
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| 关 键 词： | 肿瘤睾丸抗原 MAGE-A4 原核表达 纯化 |
PROKARYOTIC EXPRESSION AND PURIFICATION OF MAGE-A4 RECOMBINANT PROTEIN |
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