| 细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95的构建及其在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达 |
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| 引用本文： | 周必英,陈雅棠,李文桂,杨梅. 细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95的构建及其在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达[J]. 热带医学杂志, 2009, 9(3): 227-230,234 |
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| 作者姓名： | 周必英 陈雅棠 李文桂 杨梅 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,重庆,400016;遵义医学院寄生虫学教研室,遵义,563003;重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,重庆,400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30801052、No.30671835、No.30500423和No.30200239) |
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| 摘 要： | 目的构建细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95,并研究该质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达。方法超声粉碎细粒棘球蚴组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增Eg95抗原编码基因;克隆至原核表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-Eg95;转化大肠杆菌BL21,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用SDS-PAGE和Western blotting对表达产物进行分析和鉴定。结果RT-PCR扩增出471 bp的Eg95抗原编码基因;双酶切证实Eg95抗原编码基因成功插入pGEX-1λT中;SDS-PAGE分析显示表达产物为相对分子质量约42 500的重组蛋白,与预期结果一致,表达的蛋白约占菌体总蛋白的21%;Western blot鉴定显示重组蛋白能被细粒棘球蚴感染鼠血清识别。结论成功构建了细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95,该质粒在大肠杆菌BL21中获得了高效融合表达,表达的融合蛋白具有特异的抗原性。
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| 关 键 词： | 细粒棘球绦虫 重组质粒pGEX-Eg95 大肠杆菌 |
Construction and Expression of the Recombinant Plasmid pGEX-Eg95 in Escherichia coil BL21(DE3) |
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| ZHOU Bi-ying,CHEN Ya-tang,LI Wen-gui,YANG Mei. Construction and Expression of the Recombinant Plasmid pGEX-Eg95 in Escherichia coil BL21(DE3)[J]. Journal Of Tropical Medicine, 2009, 9(3): 227-230,234 |
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| Authors: | ZHOU Bi-ying CHEN Ya-tang LI Wen-gui YANG Mei |
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| Affiliation: | 1.Institute of Infectious and Parasitic Diseases;the First Affiliated Hospital;Chongqing Medical University;Chongqing 400016;2.Department of Parasitology;Zunyi Medical College;Zunyi 563003;China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Echinococcus granulosus recombinant plasmid pGEX-Eg95 Escherichia coli |
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