| 重组人成纤维细胞生长因子-20的原核表达、生物学活性鉴定及抗血清制备 |
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| 引用本文： | 姜治国,殷正丰,钱海华,康晓燕,罗祥基,李瑾. 重组人成纤维细胞生长因子-20的原核表达、生物学活性鉴定及抗血清制备[J]. 第二军医大学学报, 2006, 27(9): 0950-0952 |
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| 作者姓名： | 姜治国 殷正丰 钱海华 康晓燕 罗祥基 李瑾 |
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| 作者单位： | 第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室,上海,200438;第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室,上海,200438;第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室,上海,200438;第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室,上海,200438;第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室,上海,200438;第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室,上海,200438 |
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| 摘 要： | 目的:表达具有生物学活性的重组人成纤维细胞生长因子-20(rhFGF-20),并制备rhFGF-20抗血清.方法:应用RT-PCR从人前列腺组织总RNA中扩增FGF-20的cDNA,将其克隆到pET-24a中,在大肠杆菌中诱导表达,经NTA-Ni2 -琼脂糖亲和层析纯化,应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、细胞增殖试验进行分析鉴定,并免疫新西兰雄性白兔制备多克隆抗体,免疫双扩散法测定抗体效价.结果:构建的pET-24a-FGF-20能在大肠杆菌中高表达;诱导表达的rhFGF-20蛋白主要存在于包含体中,经包含体溶解、Ni2 -NTA His-Bind Resins亲和层析后,纯化产物呈单一条带;细胞增殖试验显示其能促进成纤维细胞生长,并具有剂量依赖性(浓度为50～5 000 ng/ml);制备的抗血清效价为1∶32,可与hFGF-20产生免疫反应.结论:大肠杆菌表达的rhFGF-20蛋白具有刺激成纤维细胞增殖的活性,制备的抗血清具有特异性.
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| 关 键 词： | 成纤维细胞生长因子-20 原核表达 免疫血清 |
| 文章编号： | 0258-879X（2006）09-0950-03 |
| 收稿时间： | 2006-01-18 |
| 修稿时间： | 2006-07-07 |
Prokaryotic expression, purification and biological activity determination of recombinant human fibroblast growth factor-20 and preparation of its polyclonal antisera |
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| JIANG Zhi-guo,YIN Zheng-feng,QIAN Hai-hu,KANG Xiao-yan,LUO Xiang-ji,LI Jin. Prokaryotic expression, purification and biological activity determination of recombinant human fibroblast growth factor-20 and preparation of its polyclonal antisera[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2006, 27(9): 0950-0952 |
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| Authors: | JIANG Zhi-guo YIN Zheng-feng QIAN Hai-hu KANG Xiao-yan LUO Xiang-ji LI Jin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | fibroblast growth factor-20 prokaryotic expression immune sera |
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