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siRNA阻断NF-κB信号通路联合5-FU对食管鳞癌细胞凋亡的促进作用
引用本文:田芳,宋敏,许培荣,刘红涛,薛乐勋.siRNA阻断NF-κB信号通路联合5-FU对食管鳞癌细胞凋亡的促进作用[J].世界华人消化杂志,2008,16(16).
作者姓名:田芳  宋敏  许培荣  刘红涛  薛乐勋
基金项目:教育部211工程重点建设资助项目
摘    要:目的: 利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达,观察其对p65表达的抑制作用及联合5-FU对食管鳞癌细胞Eca109和EC9706的影响.方法:将终浓度为50 nmol/L的p65 siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中,通过RTPCR检测0、24、48和72 h时段p65 mRNA的表达水平.Western blotting法检测p65和Bcl-2蛋白表达,Annexin V/PI复染结合流式细胞仪检测细胞凋亡,显微镜下观察p65 siRNA与5-FU单独或联合应用对食管鳞癌细胞形态学特性的影响.结果:EC9706和Eca109细胞转染p65 siRNA 24、48和72 h后,p65 mRNA的表达水平随时间的延长逐渐下调,在72 h的阻断效率最为明显,与0 h相比,差异有显著性(0.12±0.01 vs 0.28±0.05,0.1±0.01 vs 0.38±0.04,均P<0.05),转染72 h后,p65和Bcl-2蛋白表达水平下调.EC9706和Eca109转染p65siRNA后,细胞凋亡指数明显升高(6.65%±0.27% vs 2.03%±0.08%,8.03%±0.06% vs 2.66%±0.25%,均P<0.05);p65 siRNA转染72 h后,EC9706和Eca109细胞增殖较慢;当p65 siRNA与5-FU联合作用,细胞增殖明显受到抑制.结论:p65 siRNA可阻断NF-κB信号通路,下调NF-κB下游基因中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,表明活化的NF-κB信号通路可成为食管鳞癌基因治疗中一个重要的分子靶点.

关 键 词:食管鳞癌  核因子-κB  RNA干扰  5-FU  Bcl-2

Effect of siRNA-mediated inhibition of nuclear factor-κB in combination with 5-FU on apoptosis of squamous cell carcinoma cell lines
Fang Tian,Min Song,Pei-Rong Xu,Hong-Tao Liu,Le-Xun Xue.Effect of siRNA-mediated inhibition of nuclear factor-κB in combination with 5-FU on apoptosis of squamous cell carcinoma cell lines[J].World Chinese Journal of Digestology,2008,16(16).
Authors:Fang Tian  Min Song  Pei-Rong Xu  Hong-Tao Liu  Le-Xun Xue
Abstract:
Keywords:
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