大鼠横断性损伤坐骨神经后近端神经干分泌液的蛋白质组学分析和生物活性检测

目的　探讨横断性周围神经近侧神经的分泌功能 ,分泌液的蛋白质成分及其对运动神经元生长的影响。方法　建立大鼠坐骨神经横断后神经近端室、神经远端室以及混合室 (近加远端神经 )收集室模型。用蛋白质双向电泳技术和质谱分析法分析 3种收集室内液体 (收集液 )的蛋白质成分 ,并以 3种收集液培养脊髓前角运动神经元。结果　大鼠坐骨神经断端的混合室、近端室和远端室均有淡黄色清亮液体 ,其蛋白质浓度分别为 ( 5 .45± 1.2 )mg/ml ,( 3 .87± 0 .7)mg/ml和 ( 5 .68± 1.5 )mg/ml。收集液蛋白质双向电泳结果显示 3组蛋白质图谱的图案模式相似。混合室、近端室和远端室组分别检测到 10 98± 3 4,985± 47和 10 2 1± 3 6个点。蛋白质点主要分布在pH4～ 8,分子量在2 5～ 90kD的范围内。应用 3组神经断端收集液培养运动神经元发现 ,3种收集液所培养的运动神经元的细胞存活数、神经元的胞体面积、突起长度总体上大于对照组 ;实验组之间无明显差异。结论　( 1)大鼠坐骨神经横断后 ,其近端神经干具有与远端神经干相似的分泌功能 ;( 2 )蛋白质双向电泳图谱的图案显示 3种收集室的蛋白质具有同源性 ;( 3 ) 3种收集液都能促进运动神经元的存活和生长 ,且近端室和远端室收集液的作用没有差别。

Proteomics analysis and biological detection of the secretion of proximal trunk of transected sciatic nerve in rats