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| 小鼠次级淋巴组织趋化因子成熟肽基因/腺相关病毒重组载体的构建 | |
| 引用本文： | 梁春敏,钟翠平,郑宁,吴欣,孙瑞霞,刘银坤,叶胜龙.小鼠次级淋巴组织趋化因子成熟肽基因/腺相关病毒重组载体的构建[J].解剖学报,2004,35(2):147-151. |
| 作者姓名： | 梁春敏 钟翠平 郑宁 吴欣 孙瑞霞 刘银坤 叶胜龙 |
| 作者单位： | 1. 复旦大学上海医学院人体解剖学与组织学胚胎学系,上海,200032;皖南医学院组织学胚胎学教研室,芜湖,241001 2. 复旦大学上海医学院人体解剖学与组织学胚胎学系,上海,200032 3. 复旦大学肝癌研究所,上海,200032 |
| 基金项目： | 国家 8 63基金资助项目 ( 2 0 0 1AA2 1713 1)，国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 3 70 748)，复旦大学“985工程”重中之重学科项目，“2 11工程”肿瘤学科建设项目基金资助 |
| 摘 要： | 目的 构建含小鼠次级淋巴组织趋化因子(SLC)cDNA的重组腺相关病毒载体。方法 以C57BL/6J小鼠的淋巴组织为材料抽提总RNA，用RT-PCR方法克隆小鼠SLC的成熟肽基因。PCR产物回收后经EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切，插入pAAV-IRES-hrGFP质粒，用磷酸钙法，与pAAV-RC和pHelper三者共同转染HEK293细胞，包装成重组的病毒颗粒，并通过绿色荧光蛋白(GFP)报告基因荧光检测及抽提病毒DNA，进行PCR扩增等进一步证实重组病毒的形成。结果 约500bp的小鼠SLC成熟肽基因被成功克隆，序列分析表明，所克隆的SLC基因与基因库注册的相同，重组载体的酶切及测序鉴定表明SLC基因被定向插入。重组载体转染HEK293细胞，经荧光显微镜和病毒。DNA的PCR检测，证实已完成对重组病毒的包装，并表达GFP。结论 成功构建了SLC成熟肽基因重组腺相关病毒载体。 |
| 关 键 词： | 小鼠 次级淋巴组织趋化因子 成熟肽基因 腺相关病毒 重组载体 构建 |
TO CONSTRUCT A RECOMBINANT ADENO-ASSOCIATED VIRUS VECTOR CARRYING THE GENE ENCODING THE MATURE PEPTIDE OF SECONDARY LYMPHOID-TISSUE CHEMOKINE |
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| LIANG Chun-min ,ZHONG Cui-ping ,ZHENG Ning ,WU Xin ,SUN Rui-xia ,LIU Yin-kun,YE Sheng-long.TO CONSTRUCT A RECOMBINANT ADENO-ASSOCIATED VIRUS VECTOR CARRYING THE GENE ENCODING THE MATURE PEPTIDE OF SECONDARY LYMPHOID-TISSUE CHEMOKINE[J].Acta Anatomica Sinica,2004,35(2):147-151. | |
| Authors: | LIANG Chun-min ZHONG Cui-ping ZHENG Ning WU Xin SUN Rui-xia LIU Yin-kun YE Sheng-long |
| Institution: | LIANG Chun-min 1,3,ZHONG Cui-ping 1*,ZHENG Ning 2,WU Xin 2,SUN Rui-xia 2,LIU Yin-kun,YE Sheng-long 2 |
| Abstract: | |
| Keywords: | Secondary lymphoid-tissue chemokine RT-PCR Vector rAAV Mouse |
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