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碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β1诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为心肌细胞的作用比较
引用本文:罗伟琼,刘建华,张祥忠,陈嘉榆,陈运贤. 碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β1诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为心肌细胞的作用比较[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2007, 11(20): 3968-3971
作者姓名:罗伟琼  刘建华  张祥忠  陈嘉榆  陈运贤
作者单位:1. 深圳宝安区血站,广东省深圳市,518101
2. 中山大学干细胞与组织工程中心,广东省广州市,510080
3. 中山大学附属第一医院血液内科,广东省广州市,510080
4. 广东省广州市十二人民医院内科,广东省广州市,510620
5. 中山大学干细胞与组织工程中心,广东省广州市,510080;中山大学附属第一医院血液内科,广东省广州市,510080
基金项目:广东省深圳市科技计划;广东省自然科学基金;广东省广州市科技局科技攻关项目
摘    要:目的:对比观察碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β1促进大鼠骨髓间质干细胞分化为心肌细胞的作用。方法:实验于2005-12/2006-07在中山大学干细胞与组织工程中心实验室进行。实验材料:清洁级大鼠由中山大学实验动物中心提供(SCXR(粤)2004-0011,粤监证字2004A089),三四周,大约50g。实验方法:①分离培养大鼠骨髓间质干细胞,并采用流式细胞仪鉴定。②取第3代骨髓间质干细胞,以1×107L-1接种于24孔培养板和六孔板中,24h后换液并分组:对照组:仅仅更换培养液;5-氮胞苷诱导组:10μmol/L5-氮胞苷孵育24h后更换新鲜培养液;5-氮胞苷 碱性成纤维生长因子诱导组:10μmol/L5-氮胞苷孵育24h后更换含10μg/L碱性成纤维生长因子的新鲜培养液;5-氮胞苷 转化生长因子β1诱导组:10μmol/L5-氮胞苷孵育24h后更换含10μg/L转化生长因子β1的新鲜培养液。以后每3d换液1次,前2组换完全培养基,后2组分别换含10μg/L碱性成纤维生长因子和10μg/L转化生长因子β1的完全培养基。③30d后应用RT-PCR法检测心肌细胞转录因子GATA-4、结蛋白表达,免疫细胞化学染色法检测细胞心肌肌钙蛋白,并在倒置显微镜下观察细胞跳动情况。结果:①骨髓间质干细胞的生长特性及鉴定:原代培养大鼠骨髓质干细胞3d后镜下可见有细胞贴壁,形成克隆,七八天长满,随着换液和传代,细胞逐渐纯化,第3代细胞形成均一的长梭形,流式细胞仪检测发现CD44、CD29表达阳性,CD45、CD11b表达阴性。②骨髓间质干细胞向心肌细胞的分化:大鼠骨髓间质干细胞经5-氮胞苷、5-氮胞苷 碱性成纤维生长因子或5-氮胞苷 转化生长因子β1诱导30d后,有部分细胞心肌肌钙蛋白表达阳性,GATA-4和结蛋白表达明显增强。镜下观察5-氮胞苷 碱性成纤维生长因子诱导组所诱导细胞变细、胞体伸长,呈心肌样细胞跳动,并较其他两组明显,心肌肌钙蛋白阳性细胞的比率较高(P<0.05)。结论:碱性成纤维生长因子在体外有协同5-氮胞苷促进大鼠骨髓间质干细胞分化为心肌细胞的作用,而转化生长因子β1无此作用。

关 键 词:骨髓间质干细胞  碱性成纤维细胞生长因子  转化生长因子β1  细胞分化  大鼠
文章编号:1673-8225(2007)20-03968-04
修稿时间:2007-02-122007-04-07

Comparison between basic fibroblast growth factor and transforming growth factor beta 1 in the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into cardiomyocytes in rats
LUO WQ,Liu JH,Zhang XZ,Chen JY,Chen YX. Comparison between basic fibroblast growth factor and transforming growth factor beta 1 in the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into cardiomyocytes in rats[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2007, 11(20): 3968-3971
Authors:LUO WQ  Liu JH  Zhang XZ  Chen JY  Chen YX
Abstract:
Keywords:
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