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真核双基因表达载体pBud-TRAIL-IL-24的构建及其在宫颈癌细胞中的表达
引用本文:潘玥,向廷秀,章海林,陈妮,陈飞兰,赖国旗.真核双基因表达载体pBud-TRAIL-IL-24的构建及其在宫颈癌细胞中的表达[J].重庆医科大学学报,2012,37(4):302-306.
作者姓名:潘玥  向廷秀  章海林  陈妮  陈飞兰  赖国旗
作者单位:(1.重庆医科大学实验动物中心,重庆400016;2.重庆医科大学附属第一医院分子肿瘤及表观遗传学实验室,重庆400016;3.泸州医学院药物与功能性食品研究中心,泸州646000)
摘    要:目的:构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)基因和白细胞介素24(Interleutin-24,IL-24)基因的真核双基因表达载体,并观察其对宫颈癌细胞生长的影响情况。方法:采用分子克隆技术,将IL-24基因插入真核表达载体 pBud-TRAIL中,构建双表达质粒 pBud-TRAIL-IL-24,经酶切和测序鉴定后,转染宫颈癌HeLa细胞。荧光显微镜和免疫荧光双标技术检测TRAIL和IL-24在HeLa细胞中的表达。MTT法检测重组质粒对HeLa细胞生长状况的影响。结果:成功构建了真核双基因表达载体pBud-TRAIL-IL-24,并在宫颈癌细胞中表达;转染48 h后可见重组质粒对宫颈癌细胞生长有明显抑制作用(P<0.05)。结论:构建的双表达载体pBud-TRAIL-IL-24能在宫颈癌细胞中表达,并可有效抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,为进一步研究TRAIL和IL-24联合应用于宫颈癌的基因治疗奠定了基础。

关 键 词:宫颈癌细胞  双表达载体  TRAIL基因  IL-24基因
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