骨髓间充质干细胞移植治疗巨结肠的实验研究

目的在体外诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）的神经细胞分化基础上，探讨移植治疗实验性巨结肠的可能性。方法8～9周龄SD大鼠用1％苯扎氯铵（BAC）制作巨结肠模型。贴壁筛选法进行MSCs原代培养、扩增后用碱性全反式视黄酸（ATRA）和碱性成纤维生长因子（FGF2）诱导法收获Nestin、NF表达阳性的MSCs细胞，显微注射法将来源于雄性大鼠，Nestin、NF阳性表达的MSCs植入雌性实验性巨结肠模型鼠病变肠段。实验分对照组（PBS组）及实验组（MSCs组），分别于术后1、2、4周进行大体观察，钡灌肠X线检查，病理学检查、平滑肌收缩功能以及采用短路电流技术检测上皮离子转运的变化。结果BAC处理后1周，实验组大鼠出现腹胀，BAC处理段出现狭窄。MSCs被纯化并被诱导为神经细胞。MSCs组免疫组化结果显示移植后1、2、4周Nestin及NF呈阳性表达，但在PBS组未观察到阳性表达。MSCs组腹胀较轻，梗阻近端少量大便，MSCs移植组大鼠结肠上皮第一周跨膜电压升高，但第四周其基础电流下降，钠离子吸收减少；MSCs移植后第一、四周Forskolin所引起的氯离子分泌电流均较PBS组高。结论MSCs可在实验性巨结肠模型鼠结肠壁内分化为神经细胞，部分恢复结肠神经调节作用。

A preliminary study on the treatment of experimental aganglionosis by mesenchymal stem cells transplantation into colon in vivo