| 广州管圆线虫Asp-1基因的克隆表达及各虫期转录水平研究 |
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| 引用本文： | 王琳,杨潇,曲振字,刘静,刘茜,何蔼,陈婧,李卓雅,詹希美. 广州管圆线虫Asp-1基因的克隆表达及各虫期转录水平研究[J]. 广东寄生虫学会年报, 2011, 0(5): 512-515 |
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| 作者姓名： | 王琳 杨潇 曲振字 刘静 刘茜 何蔼 陈婧 李卓雅 詹希美 |
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| 作者单位： | [1]中山大学中山医学院寄生虫学教研室,广东广州510080 [2]中山大学热带病防治研究教育部重点实验室,广东广州510080 |
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| 基金项目： | 国家973基金（2010CB530004）; 国家自然科学基金重点项目（2005U0632003） |
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| 摘 要： | 目的构建广州管圆线虫天冬氨酰蛋白酶（Asp-1）基因的原核表达系统,研究该基因在各虫期的转录水平。方法构建重组质粒pET-30a（＋）-Asp-1,并转化至大肠杆菌BL21（DE3）表达载体,经IPTG诱导表达后,Ni-IDA亲和层析纯化表达产物。通过以β-肌动蛋白为内参、以各期虫cDNA为模板的实时荧光定量PCR,研究该基因在各虫期的表达水平。结果获得纯化的重组蛋白,相对分子质量约为43000,与生物信息学分析预测结果一致。qRT-PCR显示该基因在三期幼虫中表达丰度最高,四/五期幼虫、成虫雄虫、雌虫依次降低。结论 Asp-1基因的表达丰度在三期幼虫中最高的实验数据与三期幼虫感染性最强的事实相符,提示天冬氨酰蛋白酶有可能是幼虫入侵宿主的关键酶,为后续广州管圆线虫虫体侵入宿主的机制以及宿主保护机制研究打下基础。
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| 关 键 词： | 广州管圆线虫 天冬氨酰蛋白酶 原核表达 实时荧光定量PCR |
Cloning and expression of Asp-1 gene from different stages of larvae of Angiostrongylus cantonensis |
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| WANG Lin,YANG Xiao,QU Zhen-yu,LIU Jing,LIU Qian,HE Ai,CHEN Jing,LI Zhuo-ya,ZHAN Xi-mei. Cloning and expression of Asp-1 gene from different stages of larvae of Angiostrongylus cantonensis[J]. Journal of Tropical Medicine, 2011, 0(5): 512-515 |
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| Authors: | WANG Lin YANG Xiao QU Zhen-yu LIU Jing LIU Qian HE Ai CHEN Jing LI Zhuo-ya ZHAN Xi-mei |
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| Affiliation: | 1.Institute of Parasitology,Zhongshan School of Medicine,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080;2.Key Laboratory of Tropical Disease Control,Ministry of Education of China,Guangzhou 510080,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Angiostrongylus cantonensis aspartyl protease prokaryotic expression qRT-RCR |
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