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Bcl-xl基因克隆及其在SH-SY5Y细胞中的表达
引用本文:蔡晓冬,杨炼红,吕瑞妍,沈庆煜. Bcl-xl基因克隆及其在SH-SY5Y细胞中的表达[J]. 广东寄生虫学会年报, 2011, 0(3): 240-242,277,F0003
作者姓名:蔡晓冬  杨炼红  吕瑞妍  沈庆煜
作者单位:中山大学孙逸仙纪念医院神经科,广东广州510120
基金项目:广东省科技计划项目(2006B36004016)
摘    要:目的研究Bcl-xl基因在SH-SY5Y细胞中的表达。方法构建真核表达载体pIRES2-EGFP/Bcl-xl,采用脂质体介导将重组质粒导入SH-SY5Y细胞,RT-PCR和Western-blot检测外源基因表达。结果本实验成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/Bcl-xl,并用脂质体介导的方法高效转染SH-SY5Y细胞,RT-PCR显示有Bcl-xlmRNA表达增加,Western-blot显示有32kD的蛋白质表达增加。结论重组质粒pIRES2-EGFP/Bcl-xl经转染能够在SH-SY5Y细胞中高效表达,为进一步研究Bcl-xl对SH-SY5Y细胞的生物学功能奠定了基础。

关 键 词:DNA  质粒pIRES2-EGFP/Bcl-xl  SH-SY5Y细胞  转染  基因表达

Cloning of Bcl-xl gene and its transfection into SH-SY5Y cells
CAI Xiao-dong,YANG Lian-hong,LU Rui-yan,SHEN Qing-yu. Cloning of Bcl-xl gene and its transfection into SH-SY5Y cells[J]. Journal of Tropical Medicine, 2011, 0(3): 240-242,277,F0003
Authors:CAI Xiao-dong  YANG Lian-hong  LU Rui-yan  SHEN Qing-yu
Affiliation:(Department of Neurology,Sun Yat-sen Memorial Hospital of Sun Yat-sen University,Guangzhou 510120,China)
Abstract:Objective To study the expression of Bcl-xl gene in SH-SY5Y cells.Methods Plasmid pIRES2-EGFP/Bcl-xl was constructed and transfected into SH-SY5Y cells using Lipofectamine 2000.RT-PCR and Western-blot were employed to test expression of Bcl-xl.Results We successfully constructed pIRES2-EGFP/Bcl-xl.Transfection of the recombinant plasmid into SH-SY5Y cells resulted in a high level of expression of Bcl-xl RNA(by PCR) and the protein(by Western blot).Conclusion pIRES2-EGFP/Bcl-xl can be transfected and expressed in SH-SY5Y cells.The transfected cells can be used to study the effects of Bcl-xl on SH-SY5Y cells.
Keywords:DNA  pIRES2-EGFP/Bcl-xl  SH-SY5Y cells  transfection  gene expression
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