| 高糖对人肾小管上皮细胞氧化应激及蛋白质损伤效应的实验研究 |
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| 引用本文： | 汪杨,白雪源,魏日胞,陈香美,冯哲,洪权,傅博.高糖对人肾小管上皮细胞氧化应激及蛋白质损伤效应的实验研究[J].解放军医学杂志,2008,33(11):1318-1321. |
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| 作者姓名： | 汪杨 白雪源 魏日胞 陈香美 冯哲 洪权 傅博 |
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| 作者单位： | 解放军总医院全军肾脏病研究所暨重点实验室,北京,100853 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)，国家自然科学基金，解放军医药卫生科研项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨高糖对人肾小管上皮细胞(HKC)氧化应激及蛋白质氧化损伤的作用.方法 将体外培养的HKC分为3组:对照组、高糖短期处理组、高糖长期处理组.对照组葡萄糖浓度为5.5mmol/L,高糖处理组葡萄糖浓度为30mmol/L.高糖短期处理组分为6个时间点,即30min及1、6、12、24、48h高糖刺激组;高糖长期处理组为高糖连续刺激2个月.用活性氧(ROS)捕获剂氯甲基二氯二氢荧光素二乙酯(CM-H2DCFDA)孵育各组细胞,通过流式细胞技术和激光共聚焦显微镜检测高糖处理后不同时间点HKC中ROS的荧光强度以反映细胞内ROS的水平,用共聚焦显微镜检测荧光探针JC-1的荧光强度来表示线粒体膜电位,用2,4-二硝基苯肼(DNPH)比色法测定细胞内蛋白质羰基含量的变化.结果 流式细胞技术和激光共聚焦显微镜检测显示,经高糖刺激后,HKC内ROS含量在1h时达高峰,随后逐渐降低;线粒体膜电位在高糖刺激后短时间内(1h)有增高,其后下降DNPH比色法显示,短时高糖刺激对细胞中蛋白质羰基含量影响不明显(P>0.05),高糖刺激2个月时蛋白质羰基含量与短时刺激相比明显升高(P<0.05).结论 高糖处理可使HKC细胞氧化应激增强,从而造成生物大分子蛋白质的损伤.
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| 关 键 词： | 葡萄糖 肾小管 上皮细胞 活性氧 膜电位 线粒体 |
Effects of oxidative stress and its secondary protein impairment induced by high glucose content in human renal tubular epithelial cell |
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