HBx蛋白对IGF-II基因P4启动子活性的影响 |
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引用本文: | 汤绍辉,曲春晖,杨敏英,罗羽宏,杨冬华.HBx蛋白对IGF-II基因P4启动子活性的影响[J].中国病理生理杂志,2010,26(1):7-11. |
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作者姓名: | 汤绍辉 曲春晖 杨敏英 罗羽宏 杨冬华 |
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作者单位: | 暨南大学附属第一医院 1消化科, 2普通外科,广东 广州 510630 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目,广东省自然科学基金资助项目,广东省医学科学技术研究基金资助项目 |
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摘 要: | 目的:构建乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)表达载体pEYFP-C1-X及人IGF-II基因P4启动子调控的荧光素酶报告载体pGL3-P4,并初步探讨HBx对IGF-II基因P4启动子活性的影响。方法:应用基因重组技术,将HBx基因及P4启动子分别克隆入pEYFP-C1及pGL3-Basic载体,构建重组质粒pEYFP-C1-X及pGL3-P4;将pEYFP-C1-X稳定转染HepG2细胞,进行G418筛选;将体外甲基化pGL3-P4瞬时转染HepG2-EYFP-X细胞,采用双荧光素酶实验检测P4启动子的转录调控活性。结果:(1)经酶切及测序鉴定,重组质粒中的目的片段HBx和P4启动子的大小分别为465bp及1246bp,序列与GenBank数据库一致。(2)获得了表达HBx的细胞系HepG2-EYFP-X,在荧光显微镜下呈现黄绿色荧光。(3)转染HepG2-EYFP-X细胞的甲基化P4启动子的荧光素酶活性明显高于其对照细胞HepG2-EYFP(P0.01)。结论:HBx可增加P4启动子的转录活性。
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关 键 词: | 乙型肝炎病毒X蛋白 P4启动子 |
收稿时间: | 2009-7-22 |
修稿时间: | 2009-11-2 |
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